微生物生理学--微生物的营养.ppt

医学课件 医学课件 当6-磷酸葡萄糖结合到MR上以后，降低了MR对活化蛋白质A的亲和力，这时A从MR上释放下来，然后结合到运输蛋白操纵子操纵基因上，促进操纵子转录，合成6-磷酸葡萄糖运输系统，有利于物质吸收。 当胞外不存在6-磷酸葡萄糖时，活化蛋白质A与MR的亲合力高，A不能结合到操纵子的操纵基因上，转录过程不能开始，运输系统不能合成，6-磷酸葡萄糖不被吸收。 医学课件 大肠杆菌己糖磷酸运输操纵子的诱导调节方式——Saier 1979提出的调节方式 医学课件 后来又有人提出在这种调节方式中还有一种蛋白质C在活化蛋白质A与转膜调节蛋白MR之间起连接作用，控制着蛋白质A与MR的结合。 医学课件 Shattuck-Eidens和Kadner等人1983年提出的调节方式 医学课件 鼠伤寒沙门氏菌PTS操纵子转录调节 鼠伤寒沙门氏菌葡萄糖运输系统PTS中的酶Ⅰ和HPr的合成操纵子PTS的调节与调节蛋白Rp磷酸化与去磷酸化过程有关； 磷酸化的调节蛋白（Rp-P）可能是起一种阻遏蛋白的作用。去磷酸化的调节蛋白（Rp）可能是起一种激活剂的作用； 当葡萄糖加入细胞悬液里以后，调节蛋白上的磷酸转移到葡萄糖，这时去磷酸化的调节蛋白Rp直接结合到PTS操纵子控制区上，诱导PTS操纵子转录； 当葡萄糖不存在时，磷酸化的调节蛋白（Rp-P）则结合到PTS操纵子控制区，阻止了PTS操纵子的转录。 医学课件 鼠伤寒沙门氏菌PTS操纵子转录调节 医学课件 ㈡、载体物质生理活性的调节 物质运输系统中载体物质生理活性调节方式主要是在糖的运输中进行研究的，研究的结果表明糖运输系统生理活性的调节有膜电势调节、胞内磷（硫）酸糖的调节与cAMP环化酶与透过酶的共同调节等调节方式。 医学课件 1、膜电势（氧化还原电势）调节 在微生物里，某些与物质运输有关的酶只有在膜电势存在的条件下才有最大的活性。鼠伤寒沙门氏菌的柠檬酸透过酶与磷酸甘油酸透过酶的最大活性就需要膜电势存在。 膜电势可以通过基质氧化的方式产生，也可以通过加入氧化剂的方式直接产生。这种膜电势可以使还原型的葡萄糖酶Ⅱ（-SH）转变为氧化型的酶Ⅱ（-S-S-）。 在PTS系统中还原型酶Ⅱ对运输的基质亲和力高，氧化型酶Ⅱ对运输的基质亲和力低，在这两种状态中，亲和力高低可以相差100倍以上。 医学课件 膜电势调节 膜电势增加（膜内更负）可能促使酶Ⅱ氧化，糖与酶Ⅱ的亲和力降低（从能量的角度来看，供能已充足，不再大量运输物质进入细胞氧化供能）。 糖的结合能促进酶Ⅱ的还原，酶Ⅱ的磷酸化作用可以提高酶的氧化程度。 医学课件 相关实验 在膜囊里，D-乳酸是一种有效的电子供体，氰化物是一种吸收的抑制剂，这两种物质在脯氨酸的吸收上会产生相反的作用。乳酸加入会促进脯氨酸吸收，但在加入草氨酸（D-乳酸脱氢酶的一种强抑制剂）和氰化物时，抵消了乳酸加入时的促进作用。 说明这两种物质加入是通过阻止建立膜电势的方式降低膜囊对脯氨酸的吸收。 医学课件 先看一个相关试验 将在以葡萄糖为碳源的培养基上生长的细菌收集起来，经无糖的无机盐液体培养基洗涤之后，重新悬浮在无糖培养基里，经过一段时间后； 进行2种处理及结果： 在上述系统中加入乳糖，则机体能以最大的速率吸收乳糖； 在上述系统中加入葡萄糖后，再加入乳糖，则机体基本上不吸收乳糖 。 医学课件 2、cAMP环化酶和透过酶共同调节 在大肠杆菌与鼠伤寒沙门氏菌的乳糖吸收中存在cAMP与透过酶共同调节，其中胞内cAMP浓度通过cAMP环化酶的活性变化进行控制，因此乳糖的吸收实际上也是cAMP环化酶与透过酶共同调节的。 一种调节蛋白(Rpr)能够通过磷酸化与去磷酸化的方式来控制环化酶与透过酶的活性。 调节蛋白磷酸化之后能与环化酶结合，使环化酶获得活性，去磷酸化的调节蛋白可以与有活性的透过酶结合，并导致透过酶失去活性。 医学课件 透过酶与环化酶的联合调节 医学课件 cAMP的代谢方式与作用 胞内cAMP浓度除受环化酶活性影响以外，还受葡萄糖分解代谢产物的影响，在这类产物的作用下会导致cAMP分泌到胞外和转变成AMP，从而影响糖的吸收（后面再详细介绍）。 cAMP 受体蛋白 医学课件 相关试验 在向金黄色葡萄球菌菌悬液里加入甲基-β-硫代半乳糖苷，15分钟后再加进14C-甘油，发现金黄色葡萄球菌胞内的放射性比未加甲基-β-硫代半乳糖苷的对照低得多。 将14C-甘油与甲基-β-硫代半乳糖苷同时加到菌悬液里，开始时甘油吸收的速率等于未被抑制时的速率，但在几分钟后，才表现出抑制作用。 说明：甲基-β-硫代半乳糖苷只有进入胞内并经积累之后才能有能力抑制金黄色葡萄球菌对甘油的吸收。 医学课件 3、胞内磷（硫）酸糖的调节 许多资料表明细胞内某些不能被利用的磷（硫）酸糖（酸化）能抑制革兰氏阴性、阳性细菌和包括酵母菌在内的真核