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利用雷射显微切割/压力弹射技术和奈米
液相层析串联式质谱仪 (LC/MS/MS)
对死 人类脑组织中的蛋白质进行鉴定
应用文摘
Christian Sauber
安捷伦科技
Bernd Sägmüller
PALM显微雷射科技
Manuela Neumann 和 Hans A. Kretschmar
慕尼黑路德维希 马克西米利安大学
-
导言 实验部分
大多数的神经退化性疾病,例如帕金森氏症、阿滋海 样品取得
默症等,在分子层面的发病机制现今尚未研究清楚。 组织样品来自於德国慕尼黑路德维希 马克西米利安
-
目前,大多数蛋白质的表现分析都是在以完整组织的 大学神经病理学系。样品取自死 的人类小脑,其中
均质化 备样品为基础上所完成的,用这种方法所 包含了白质和皮质。样品依神经病理学的方法,以
备的样品,无法提供在特定种类的细胞上所发生之特 厚度 代表一层细胞层, 依苏木精 曙红标
10-15 µm -
定改变的相关资讯。本研究的目的即在探讨利用雷射 淮 染色法 , 进行
十 (Hematoxylin-Eosin Staining HE)
显微切割方法在单一脑组织所取得的细胞能否用於蛋 染色 (如图 1)
白质表现的分析。
利用雷射显微切割与压力弹射技术 (LMPC) 所取得的
人脑组织是应用 PALM MicroBeam IP 系统所提供的
337 nm 氮气雷射来完成的。雷射压力弹射 (LPC) 与
均质化的软体控制部分则是利用 PALM RoboSoftware
中的自动压力弹射 (AutoLPC) 功能,先在感兴趣的
部分描绘出面积分别为 5、10 和 20 mm2 的轮廓,再
利用雷射显微切割/雷射压力弹射技术和奈米液相层析串联式质谱仪对死 安捷伦科技
人脑组织中的蛋白质进行鉴定
胰蛋白酶降解是在 37 的温度条件下,过夜反应,在
每 2 细胞中加入 胰蛋白酶 ,
10 mm 800
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