人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch 通路信号分子表达的变化.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, June 25, 2007, 59 (3): 267-272 267 研究论文 人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch 通路信号 分子表达的变化 1,2,* 1,2 1,3 1 1,2 1,3 1 邢 莹 ，白瑞樱 ，鄢文海 ，韩雪飞 ，段 萍 ，许 燕 ，樊志刚 1 2 3 郑州大学基础医学院 干细胞研究中心； 生理学教研室； 病理生理学教研室，郑州 450052 摘要：本研究探讨Notch 信号通路在人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells, hMSCs)体外增殖及向神经细胞分 化过程中的作用。采集健康自愿者骨髓，体外培养获得hMSCs ，取第3 代hMSCs ，在诱导剂( β-ME, DMSO, BHA)作用 下向神经细胞分化。诱导后用免疫细胞化学鉴定神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)和尼氏体的表达以确 定诱导效果；用流式细胞术检测细胞生长周期时相的变化。在诱导前后，用免疫荧光和RT-PCR 方法检测Notch 通路中 Notch1 受体蛋白、配体Jagged 1 (JAG1) 、调节蛋白活化相关物早老素1 (presenilin 1, PS1)、靶基因hairy and enhancer of split 1 (HES1)信号分子表达的变化。结果显示：诱导前，处于G /G 期的hMSCs 占58.5% ，S+G /M 期的细胞占41.5% ；诱 0 1 2 导后，G /G 期细胞比例升高，而S+G /M 期细胞比例下降，NSE 阳性细胞率达(77±0.35)% ，细胞质中可见深蓝色的块状 0 1 2 或颗粒状尼氏体。免疫荧光显示，诱导前后hMSCs 内 Notch1 和JAG1 均呈阳性表达，但RT-PCR 检测发现诱导后Notch1 、 JAG1 、PS1 和HES1 mRNA 表达量较诱导前明显降低(均P0.05) 。结果表明，诱导hMSCs 向神经细胞分化能抑制Notch 信号分子表达，低水平的Notch 信号激活可能有利于神经细胞的分化。 关键词：骨髓间充质干细胞；N o t c h 1 ；J AG 1 ；早老素1 ；H E S 1 ；分化；神经细胞 中图分类号：R 3 3 1 Expression changes of Notch-related genes during the differentiation of human mesenchymal stem cells into neurons XING Ying1,2,*, BAI Rui-Ying1,2, YAN Wen-Hai1,3, HAN Xue-Fei1,2, DUAN Ping1,2, XU Yan1,3, FAN Zhi-Gang1 1 2 3 The Stem Cells Research Center; Department of Physiology; Department of Pathophysiology, College of Basic Medical Sciences, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China Abstract: The Notch signaling pathway has been implicated in the regulation of cell-fate decisions such as differentiation of embryo stem cell