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高三生物 实验专题复习8 叶绿体色素的提取和分离
一.实验目的:
思考题1.尝试用_________方法提取叶绿体中的色素和用________法分离提取到的色素。
2.分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。
二.实验原理: 叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于无水乙醇等有机溶剂中。
思考题2.叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,溶解度____________随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度________________随层析液在滤纸上扩散得慢;
三、实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶
思考题3.为什么选用幼嫩、鲜绿的菠菜叶作为实验材料?________________________
四、实验步骤:
1.提取色素:5克绿叶剪碎,放入研钵,加少量SiO2、CaCO3和lmL无水乙醇,迅速、
充分研磨。
思考题4.加SiO2、加CaO3的目的是什么?____________________________________
思考题5.为什么要迅速研磨?________________________________________________
2.收集滤液:漏斗基部放一单层尼龙布,研磨倒入漏斗内挤压,将滤液收集到小试管中,
用棉花塞塞住试管口。
3.制备滤纸条:将干燥的滤纸,顺着纸纹剪成长10cm,宽lcm的纸条,一端剪去二个角,并在距这端lcm处划铅笔线。
思考题6.将干燥的滤纸的端剪去二个角的目的是什么?________________________
4.画滤液细线:用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线,干后重复三次。
思考题7.为什么滤液细线越细、越齐越好?____________________________________
思考题8.为什么画滤液细线需要重复三次?____________________________________
5.分离绿叶中的色素
将3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯。注意:层析液不能没及滤纸条的滤液细线,烧杯要盖培养皿盖。
思考题9.为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线?_____________________________
思考题10.为什么烧杯要盖培养皿盖?_______________________________________6.观察实验结果
思考题11.请在右图中标示出相应的色素及其颜色:_________________________________
思考题12.提取和分离叶绿体色素的关键是什么?_________________________________
参考答案
思考题1、过滤;纸层析 思考题2、高的;低的 思考题3、细胞中富含有叶绿体、色素;
思考题4、加SiO2为了研磨得更充分;加CaO3防止研磨时色素被破坏。
思考题5、减少研磨过程叶绿素的分解,减少酒精的挥发。
思考题6、可使层析液同时到达滤液细线,层析时,色素分离效果好。
思考题7、为了防止色素带之间部分重叠。
思考题8、为了增加色素在滤纸上的附着量,实验结果更明显。
思考题9、防止色素溶解在层析液中,影响实验结果。
思考题10、层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。
思考题11、详见右图:
思考题12、提取叶绿体色素的关键是:①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要迅速、充分;③滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是:一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。
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