基础研究海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1.pdfVIP

·580 · 南方医科大学学报（J South Med Univ ） 2012;32(4) 基础研究 海马胆碱能神经刺激肽通过活化3 型毒蕈碱受体促进INS- 1细胞 胰岛素释放 高 飞，陈 宏，张 桦，郭南京，徐艳花，蔡德鸿 南方医科大学珠江医院内分泌科，广东 广州 510282 摘要：目的 明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS- 1细胞胰岛素分泌影响，并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进 行分析。方法 INS- 1细胞随机分为3组：对照组、HCNP 组、HCNP+佛波酯（PMA）组。对照组给予RPMI 1640液培养，HCNP 组 给予人工合成HCNP（50 pg/ml ）与RPMI 1640液共培养，HCNP+PMA 组予人工合成HCNP 与RPMI 1640液共培养后，行胰岛素 释放前18 h 加入PMA（10 nmol/L）；应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR 检测对 照组、HCNP 组HCNP 前体蛋白（HCNP-pp）、胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）、3 型毒蕈碱样受体（3-type muscarinic receptor, M R）基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L 葡萄糖，三组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6 3 mmol/L、16.7 mmol/L 葡萄糖作用下，HCNP 组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA 组，差异具有统计学意义。HCNP 组INS- 1 细胞HCNP-pp、ChAT、M R 三者mRNA 含量均高于对照组，差异具有统计学意义。结论 HCNP 通过提高ChAT 活性，推测影响 3 乙酰胆碱合成，进一步活化M R ，促进胰岛素分泌，PMA 可阻断此作用。 3 关键词：海马胆碱能神经刺激肽；INS- 1细胞；胰岛素；3 型毒蕈碱受体 中图分类号：R34 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2012）04-0580-03 doi: 10.3969/j.issn. 1673-4254.2012.04.032 /kcms/detail/44.1627.R1710.005.html Insulinotropic action of hippocampal cholinergic neurostimulating peptide mediated by activated type 3 muscarinic receptor in INS-1 cells GAO Fei, CHEN Hong, ZHANG Hua, GUO Nanjing, XU Yanhua, CAI Dehong Department of Metabolism and Endocrinology, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510282, China Abstract: Objective To characterize the insulinotropic action of hippocampal cholinergic neurostimulating peptide (HCNP) and analyze the role of type 3 muscarinic receptor (M R) pathway in the action of HCNP. Methods INS-1 cells were incubated 3 in routine RPMI 1640 medium (control group), RPMI 1640 supplemented with 50 pg/ml synthetic HCNP (HCN