高中生物《第五章 第二节 多聚酶链式反应扩增nda片段》课件4 新人教版选修1.pptVIP

课题2 多聚酶链式反应（PCR)扩增DNA片段 温故知新1 组成DNA分子的基本单位是什么? 这些基本单位是如何连接成DNA分子的? DNA分子结构有什么特点？ 一、PCR原理： PCR（多聚酶链式反应）技术 是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。 利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 * * 脱氧核苷酸 脱氧核苷 磷酸 脱氧核糖 含氮碱基 嘌呤 嘧啶 腺嘌呤（A） 鸟嘌呤（G） 胞嘧啶（C） 胸腺嘧啶（T） 1 2 3 4 5 碱基 OH O O P O HO OH O O P O HO 碱基 OH OH O O P O HO 碱基 O OH O O P O HO OH 碱基 碱基 脱氧核糖 磷酸基团 碱基 脱氧核糖 碱基 脱氧核糖 5’ 3’ 脱氧核苷酸链结构简图 磷酸二酯键 5’ 5’ 3’ 3’ DNA分子的复制需要哪些条件？ DNA分子的复制过程是怎样的？ 温故知新2 DNA母链：提供复制的模板 解旋酶：打开DNA双链 4种脱氧核苷酸：合成子链的原料 DNA聚合酶：催化合成DNA子链 ATP：为复制过程提供能量 引物：使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 DNA复制的条件 DNA母链：提供复制的模板 解旋酶： 打开DNA双链 4种脱氧核苷酸：合成子链的原料 DNA聚合酶： 催化合成DNA子链 ATP：为复制过程提供能量 引物：使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 PCR反应的条件 80—100℃ 耐热的DNA聚合酶 缓冲溶液：维持反应的pH值不变 二、PCR反应的过程 1、变性： 温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚成为单链。 2、复性（退火）： 温度下降到50℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。 3、延伸： 温度上升到72℃左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对的原则合成新的DNA链。