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* 专题四 酶的研究与应用 课题3 酵母细胞的固定化 优点: 催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。 存在的缺陷: 1.通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活; 2.溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3.反应后会混在产物中,可能影响产品质量。 解决的办法: 酶制剂 固定化酶技术 什么是固定化酶? 水溶性酶 水不溶性载体 水不溶性酶 (固定化酶) 固定化技术 1.什么是高果糖浆?使用它有何好处? 2.生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么? 这种酶有何特点? 3.了解高果糖浆生产过程 4.这种方法的优点是什么? 一、固定化酶的应用实例 阅读P49-50,并思考: 基础知识 高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。 1.什么是高果糖浆?使用它有何好处? 你能写出果糖的分子式吗? 它属于什么糖? 生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶;其作用是将葡萄糖转化为果糖;这种酶稳定性好,可持续发挥作用。 2.生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 酶溶于葡萄糖溶液后,就无法回收,造成很大的浪费。 3.固定化酶技术生产高果糖浆的过程: 注意反应柱的各部分名称。 (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离 (2)固定在载体上的酶可以被反复利用 你能说出反应柱的优点吗? 4.固定化酶技术的优点: ①反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本. ②提高了果糖的产量和质量。 在生产实际中使用固定化酶技术的不足: 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术 怎么办? 二、固定化细胞技术 阅读P50:思考以下几个问题 2.固定化酶或固定化细胞技术分别适合使用哪种方法?为什么? 1.什么是固定化酶或固定化细胞技术,可以采用什么方法固定? 3.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 4.本课题采用包埋法固定细胞,常用的载体材料有哪些? 利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。可用包埋法、化学结合法和物理吸附法 1.什么是固定化酶或固定化细胞技术,可以采用什么方法固定? 化学结合法 物理吸附法 包埋法 半透膜微囊 2.固定化酶或固定化细胞技术分别适合使用哪种方法?为什么? 特 点 适宜固 定法 细胞 酶 固定对象 化学结合法 物理吸附法 包埋法 体积小,固定一种酶包埋法容易丢失 体积大,固定一系列酶 难以化学结合和吸附 3.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 联系:应用相同,都能催化某些反应 区别: (1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收; (2)固定化细胞技术对酶活性影响更小; (3)固定化细胞固定的一系列酶; (4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制; 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺 其共同的特点是不溶于水的多孔性载体 海藻酸钠 聚丙烯酰胺 4.本课题采用包埋法固定细胞,常用的载体材料有哪些? (一)制备固定化酵母细胞 阅读P50~51思考下列问题: 1.制备过程包括哪几个步骤? 2.你认为哪个步骤的操作是最重要的一环? 实验操作 1.制备过程包括哪几个步骤? 配制CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合 固定化酵母细胞 酵母细胞的活化 CaCl2的作用是使海藻酸钠胶体发生聚沉,形成凝胶珠。 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配置好的CaCl2溶液中,滴加在CaCl2溶液中形成凝胶珠, 凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30分钟。 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 2.你认为哪个步骤的操作是最重要的一环? 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。 图为某同学利用海藻酸钠固定化酵母细胞的实验结果,出现此结果的可能原因有 A.海藻酸钠浓度过高 B.酵母细胞已经死亡 C.注射器中的溶液推进速度过快 D.注射器距离CaCl2溶液液面太近 ACD *
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