大肠癌裸鼠移植模型研究进展.pdfVIP

·３１８· 中华消化外科杂志２００９年８月第８卷第４期　ＣｈｉｎＪＤｉｇＳｕｒｇ，Ａｕｇｕｓｔ２００９，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．４ ·综述 · 大肠癌裸鼠移植模型研究进展 涂经楷　傅仲学 　　大肠癌是消化道常见肿瘤，恶性程度高，严重威 移率极低。 胁人类健康。要深入研究大肠癌的生物学特性、癌 变机制、肿瘤诊断、抗癌药物筛选以及新型治疗策 ２　大肠癌裸鼠脾脏种植肝转移模型 略，建立稳定、可靠和重复性好的动物模型是十分必 　　１９８４年Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ等提出研究人类肿瘤肝脏转 移的最佳模式为脾脏内种植癌细胞。基于此原理， 要的。本文就人大肠癌裸鼠移植模型的构建方式、 ［３］ Ｗａｒｕｓａｖｉｔａｒｎｅ等 先后建立了人结肠癌、胃癌及胰 主要适用范围及其优缺点综述如下。 腺癌等肝转移模型，并广泛应用于消化道肿瘤肝转 １　大肠癌裸鼠皮下种植模型 移的研究。根据脾脏种植人结直肠癌细胞后是否切 ［４］ ［５］ 　　１９６９年Ｒｙｇａａｒｄ和Ｐｏｖｌｓｅｎ将人结肠癌接种于 除脾脏分为脾脏保留法 和脾脏切除法 。 裸鼠皮下获得成功，首次成功地建立了人结肠癌裸 ２．１　脾脏保留法 ［４］ 鼠皮下种植模型。由于该模型在形态学、生物学及 　　ＤｖｏｒｙＳｏｂｏｌ等 在脾被膜下注射ＩＥＣ１８活性 ５ 生物化学特性等方面与人体来源的肿瘤相似，已成 转染癌细胞悬液００５ｍｌ（５×１０／ｍｌ），然后还纳脾 为研究人类肿瘤的常用方法。其接种的方式主要有 脏关腹。观察到脾脏接种至肝转移形成的理想时间 癌组织块法和癌细胞悬液法。 为１８～２１ｄ。此法的缺点是在肝脏转移瘤形成的同 １．１　癌组织块法 时，会形成脾脏肿瘤。此外制备此模型时需注意如 　　无菌条件下取人大肠癌标本中直径为０５～ 下几点：（１）裸鼠麻醉不宜过深，术中失血不可过 １０ｃｍ的癌组织（淋巴结中的癌组织亦可）数块，去 多，否则易致裸鼠死亡。（２）裸鼠脾内注入癌细胞 除坏死组织，经含有抗生素的Ｈａｎｋｓ液浸泡、冲洗、 悬液宜缓慢，以防癌细胞从注射部位溢出。（３）癌 滤纸吸干，放入含抗生素的ＲＰＭＩ１６４０液中，剪成直 细胞必须制备成单细胞悬液，使之能随血流顺利地 径为１０～２０ｍｍ的小块并种植到裸鼠皮下。当 进入肝脏。 其长至１０ｃｍ×１５ｃｍ时，取出癌组织块，继续传 ２．２　脾脏切除法 ［５］ ７ 代。 ［１］ 　　Ｋｉｎｕｙａ等 将０１ｍｌＬＳ１８０（２×１０／ｍｌ）细胞 Ｇｕｅｎｏｔ等 用此方法对临床Ｂ１到Ｄ期的结肠 癌组织块进行皮下种植并传代研究，未见肿瘤的遗 悬液注入脾脏，２ｍｉｎ后切除脾脏，７ｄ后在肝脏内 传特性和组织学特性的改变。 可观察到肝转移小结节形成，大小约几百微米；１４ｄ １．２　癌细胞悬液法 后转移结