谷氨酰胺转胺酶在毕赤酵母菌的初步表达.pdfVIP

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2017-09-14 发布于湖北
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谷氨酰胺转胺酶在毕赤酵母菌的初步表达.pdf

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谷氨酰胺转胺酶在毕赤酵母菌的初步表达何冬兰，叶程，王亚南，覃桂 (中南民族大学生命科学学院，武汉430074) I酶切线性化处理后纯化重组质摘要从重组菌株pPIC3．5k—MTG／DH5ct提取重组质粒pPIC3．5k．MTG，经Sac GSll5成功表达出了TGase 粒电击转化到毕赤酵母菌中，用甲醇诱导表达，经SDS—PAGE鉴定重组质粒P．pastoris U／mL．蛋白，并初步纯化获得了较纯的目的蛋白，其表观分子量为47kD，酶活为0．50 关键词谷氨酰胺转胺酶；毕赤酵母；表达 1672-4321(2013)01-0032-04 中图分类号Q556文献标识码A文章编号 in The of Gene pastoris PreliminaryExpressionTransglutaminasepichia lie Gui Donglan，YeCheng，WangYa’nan，Qin ofLife for Sciences，South-CentralNationalities，Wuhan，430074，China) (College University AbstractReconstructed k—MTGwasobtainedfromrecombinantstrain k-MTG／ expressionplasmidpPIC3．5 pPIC3．5 linearedSacI wastransformedinto GSl15 DH5cc．Afterby digesting，plasmid pichiapastoris throughelectroporation．The Wasinductedmethan01．SDS．PAGEshowedthattherecombinant recombinant GSl15 P．pastoriz P．pastoris by analysis with of47kDand of0．50U／mL GSl15 tracelular molecular by expressed proteinapparent weight enzymeactivity preliminarypurification． Keywords MTG；pichiapastoris；expression k-MTG转入毕赤酵母中诱导表达，直接产 20世纪90年代，国外学者首次通过微生物发pPIC3．5 酵获得谷氨酰胺转胺酶¨j，掀起了该酶的生产热生有活性的目的蛋白，为解决MTG生产成本过高、潮，微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)，由于其在分子产量不能满足食品工业需求等实际问题提供初步内或分子问特