NPR1基因植物表达载体构建及对玉米的遗传转化.pdfVIP

农业开发与装备 2013年第6期 科 技 纵 横 NPR1基因植物表达载体构建及对玉米的遗传转化 马 力，兰 磊，郝明远，高 杰，王培真，于蕴吉 （长春市农业科学院，吉林长春 130111） 摘要：为了提高玉米的广谱抗病性，从拟南芥中克隆NPR1基因， DH5α。通过PCR鉴定后，将其回收产物测序。序列测定由TaKaRa 构建以bar基因为筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3301-NPR1，通 公司完成。 过农杆菌介导法将pCAMBIA3301-NPR1转入玉米自交系‘H99’的愈 1.2.2 植物表达载体pCAMBIA3301-NPR1的构建及鉴定 伤组织中，用含10mg/mL草胺磷的筛选培养基进行筛选，共获得34 用NcoI/BstEⅡ分别双酶切目的片段和植物表达载体 株再生植株；经过PCR和RT-PCR鉴定，得到14株RT-PCR阳性植株。 pCAMBIA3301，用试剂盒回收相应DNA片段，用T4连接酶连接，并 结果表明，NPR1基因在玉米中得到表达。