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第21卷第3期 激光生 物学报 V01．2lNO．3
2012年6月 ACTALASERBIOLOCYSINICA June．2012
doi：10．3969／j．issn．1007-7146．2012．03．009
人13一actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备
吴俊文h，许凤h，熊璎珞h，鲁健h，邱义兰h，刘胜姿¨，李烨h，刘如石h+
(1．湖南师范大学a．生命科学学院，湖南长沙410081；b．医学院，湖南长沙410013)
摘
蛋白，以纯化的人B—actin蛋白作为抗原免疫BALB／c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人
B—actin蛋白McAb的杂交瘤细胞，命名为284。采用间接ELISA和Westernblot方法对McAb的特异性、稳定性
和适用范围进行鉴定。结果显示：蛋白的相对分子质量为43kDa，可溶于8moL／L尿素；杂交瘤细胞上清的抗体
X10
效价为1×105，腹水的抗体效价为17；间接ELISA结果表明，杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月
后，分泌的抗体效价不变；37℃保存24h后，抗体的效价开始下降。Westernblot结果显示，单克隆抗体识别人、
鼠、兔和鱼的3-actin蛋白，与其发生特异性反应。284分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫
学试验，具有良好的应用价值。
关键词：原核表达；电洗脱；单克隆抗体；13-actin
中图分类号：Q813．2
文献标识码：A
文章编号：1007-7146(2012)03-0238-07
ofHuman Proteinand
ProkaryoticExpression 13·actin Preparation
ofIts
Monoclonal
Antibody
WU Rushil。+
Juwenl。，XUFen918，XIONG×inglu01。，LUJianl。，QIUYilanl。，LIUShengzil6，LIYel4，LIU
Normal ofLife
(1．HunanUniversitya．College Sciences，Changsha410081，Hunan，China；
b．Medical
CoHege，Changsha410013，Hunan，China)
ordertoobtain cells monoclonal human
Abstract：In hybirdomasecreting antibody(McAb)directlyagainst B·actin，
BALB／c which
micewereimmunizedwith humanB—actin fromE．coli．Aftercell
purified protein prokaryotieexpressed
fusionand cellstrainwiththe to secreteMcAb human was
screened，one B—actin
being hybridoma abilitys
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