P2X2和P2X4受体的调制位点.pdfVIP

生理科学进展 2011年第42卷第 5期 P2X2和 P2X4受体的调制位点木 彭 芳 张玉芹 (武汉科技大学医学院生理学教研室，武汉430065) 摘要 P2X受体是非选择性阳离子通道，广泛分布于中枢及外周神经系统。近年来，本实验室侧重 研究重金属、质子、酒精等对P2x2和 】]2x4受体的调制。研究发现不同的因素对同一种受体介导 的ATP．激活电流有不同的调制作用，如增强效应、抑制效应或者两种效应兼有，而且同一种因素对 这两种受体的调制效应也不相同。因此，我们推测P2X受体上存在不同的结合位点，本文主要阐 述 P2X2和P2X4受体不同的调制位点。 关键词 I)2X2受体；P2X4受体；调制；定点突变技术 中图分类号 Q42；Q71；R34；R338 ATP不仅是细胞内的组成成分和能源物质，也 细胞，CA30的突变并不影响最大电流及受体对 ATP 是一种广泛分布于中枢神经系统的兴奋性神经递 的敏感性。然而，c9的突变使最大 电流降低 了 质／调质，通过与相应的受体结合从而发挥多种重要 60％，受体对 ATP的敏感性只有原来的 1／3。二硫 的生物学功能。ATP受体包括促离子型的P2X受 苏糖醇对 c9突变的通道最大电流及受体对ATP的 体和促代谢型的P2Y受体。P2X受体 由胞内的C 敏感性没有影响，提示受体胞 内二硫键对 P2X2受 末端和N末端、M1及 M2两个疏水结构域组成，连 体与ATP的相互作用非常重要，且 C9参与二硫键 接M1和M2的是由300个氨基酸组成的亲水性胞 的形成 。 外环(图1)。一些主要的氨基酸如组氨酸、天门冬 二、几种因素对 P2X2和 P2X4受体的调制及 氨酸、谷氨酸或者半胱氨酸在P2X受体各亚型胞外 作用位点 域都不同。激动剂与P2X受体的结合可以被很多 (一)锌和铜对P2X2的调制及参与调制的位点 因素调控，包括金属、胞外离子、乙醇及 pH等等。 锌和铜是生活中必不可少的痕量金属，在酶促反 P2X4受体是P2X家族中第一个在脑中被发现的亚 应中可作为催化剂。痕量金属可能是新的离子型受 型，并且在周围组织中也有表达；而P2)(2受体在多 体的变构调质，是中枢神经系统配体门控通道的非 种神经细胞中表达。本实验室研究结果发现，多种 典型调制因子，其调制位点主要集中在胞外环 (图 金属如锌、铜、镉、汞、镁 以及pH等对P2X2和P2x4 1)。通过变构效应的影响，低浓度的锌和铜能增强 受体的调制是通过变构调节的方式实现的，调制位 大鼠P2X2受体电流，EC。下降，但 ATP最大电流不 点位于胞外环 (图1和图2)。近年来国外有大量研 变。有研究者推测，锌和铜在大鼠P2X2受体上可 究通过嵌合体及定点突变技术，也鉴定出P2X受体 能作用于同一位点，因为锌在这个位点处于饱和状 上一些起重要作用的调制位点。 态时，铜不再增强P2X2受体介导的ATP激活电流， 一 、 P2X2受体胞 内位点与ATP激·活电流 即所谓的 “最大效应”_2J。胞外域十个保守半胱氨 有研究显示 P2X2受体胞内二硫键影响ATP与 酸中的七个突变成丙氨酸几乎消除了锌对该受体的 P2)(2受体的反应。P2)(2受体有两个胞内半胱氨酸 正性变构影响，提示这些残基在锌对 P2x2受体的 残基，一个是位于N末端的C9，另一个是位于C末 调制中有重要的作用。这些突变体降低了ATP对 端的C430 。将c9和C430分别突变成丙氨酸，然 受体的亲和力，表明半胱氨酸残基可能形成二硫键， 后将野生型的受体和突变了的受体表达在非洲爪蟾