浓香型成品大曲中三类水解酶的分离纯化研究.pdfVIP

酿酒科技 2011年第 10期 (总第 208期)·LIQUOR—MAKINGSCIENCETECHNOLOGY 2011No．10fTo1．208) 浓香型成品大曲中三类水解酶的分离纯化研究 周新虎 ，陈 翔 ，赵星辉 ，葛向阳1,2 (1．江苏洋河酒厂股份有 限公司 ，江苏 宿迁 223800；2．江南大学 ，江苏 无锡 214122) 摘 要： 采用盐析、离子交换、分子筛筛选等方法分离、纯化浓香型大曲中糖化淀粉酶、液化淀粉酶和酸性蛋 白 酶，研究了3种酶的相关酶学特性。结果表明，成品浓香型大曲中，糖化淀粉酶活力均值为441．0U／g干 曲，液化 淀粉酶活力为 5．68U 干 曲，酸性蛋白酶活力均值达 51．2U惶干 曲。糖化淀粉酶纯化倍数平均达 2．44倍 ，酶活回 收率为2．51％，表观分子量 2．5×1O，液化淀粉酶的纯化倍数平均达 3．24倍，酶活回收率 28．28％。酸性蛋 白酶纯化 倍数平均达4．05倍 ，酶活回收率可达 35．62％。 关键词： 浓香型大曲； 糖化淀粉酶； 液化淀粉酶； 酸性蛋 白酶 中图分类号：TS262．3l；TS261．4；TS261．1 文献标识码 ：A 文章编号：1001—9286(2011)10—0038—04 Separation PurificationofThreeKindsofHydrolytic Enzymefrom Luzhou-flavorDaqu ZHOU Xinhu，CHENG Xiang ．ZHAO XinhuiandGEXiangyang (1．YangheDistilleryCo．Ltd．，Suqian，Jiangsu223800；2，JiangnanUniversity，Wuxi，Jiangsu214122，China) Abstract：Threekindsofhydrolyticenzymeincluding —amylase．glucoamylaseandacidproteasewereseparatedrfomLuzhou—flavorDaquand thenpurifiedbysalting-out，ion—exchange，molecularsievescreeningmethods．Theirenzymaticpropertieswerestudied．Theresultsshowedthat themeanactivityvaluesofglucoamylase，—amylase，andacidproteaseinLuzhou—flavorDaquwere441．0U／g(dryDaqu)，5．68U／g(dryDaqu) and51．2U／g (dryDaqu)respectively，andtheiraveragepurifyingtimesandenzymeactivityrecoverywere2．44timesand2．51％ (apparent molecularweightofglucoamylasewas2．5x109，3．24timesand28．28％，and4．05timesand35．62％，respectively． Keywords：Luzhou—flavorDaqu；c~-amylase；glucoamylase；acidprotease 中国酒 曲历史悠久，大曲对酿造 白酒 的品质提高起 长期的驯化生长作用 ．酒 曲中的蛋 白酶主要以酸性蛋 白 着至关重要的作用。传统大曲采用生料制曲、自然接种 ， 酶为主。酸性蛋白酶在 白酒酿造的发酵过程中起协同作 在封闭环境内固态发酵而成。制曲过程中自然界各种微 用，溶解发酵原料的颗粒 ，促进微生物繁殖 ，分解蛋白质 生物富集到淀粉质原料制成的曲坯上 ，经过人工培养 ，形 生成香味物质，分解酵母菌体蛋白[6】。曲霉及其他霉菌如 成各种有益的酿酒微生物菌系和酶系，再经风干 、贮存 ， 青霉 、根霉都可以产生胞外分泌型酸性蛋 白酶。 即成为成品大 曲。因而大曲是酿制传统大曲酒的糖化剂 、