青枯雷尔氏菌Tn5转座子无致病力突变株构建及其生物学特性研究.docVIP

青枯雷尔氏菌Tn5转座子无致病力突变株构建及其生物学特性研究 程本亮1,2，车建美1，刘波1* (1.福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建福州350003； 2. 福建农林大学生命科学学院，福建福州 350002) 摘 要：本研究通过Tn5转座子随机插入青枯雷尔氏菌(Rs91)获得1004株转座子随机插入突变株，经过在TTC平板上的形态特征筛选,其中有13株突变株具有无致病力青枯雷尔氏菌的形态特征。对其中5株无致病力突变株进行反向PCR测序和序列比对，分析鉴定出这些年株青枯雷尔氏菌突变株的插入位点在phcA基因和phcS基因上，经番茄盆栽苗致病力检测,确定为无致病力菌株。比较了这5株突变株与原始菌株的生理生化特性，这5株突变株的生长速率和相对胞外多糖含量显著低于Rs91，但最适pH值和最适温度未发生变化。5株突变株TTC液体培养基上清液在紫外-可见分光光度计上于400-450nm波长上吸收峰的扫描结果，通过聚类分析发现这5株突变株与原始菌株Rs91分别聚为不同的三类，即Rs91为第I类，phcA基因突变株为第II类，phcS基因突变株为第III类。：青枯雷尔氏菌；无致病力；反向PCR Characteristics CHENG Ben-liang1,2, CHE Jian-mei1,LIU Bo1* (1.Agricultural Bio-Resources Researc