西瓜专化型尖孢镰刀菌FonSIX6缺失突变体的构建.pdfVIP

... ... 浙江农业学报ActaAgriculturaeZhejiangensis，2013，25(2)：288-292 http：／／www．~nyxb．Cfl 唐宁安，牛晓伟，张跃建，等．西瓜专化型尖孢镰刀菌FonSIX6缺失突变体的构建 [J]．浙江农业学报，2013，25(2)：288—292． DOI：10．3969／j．issn．1004—1524．2013．02．16 西瓜专化型尖孢镰刀菌FonSIX6缺失突变体的构建 唐宁安 ，牛晓伟 ，张跃建 ，寿伟松 ，范 敏 ， (’浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江 金华 321004；浙江省农业科学院 蔬菜研究所，浙江 杭州 310021) 摘 要：病原菌和植物相互作用时分泌效应蛋白(effectors)抑制植物的防卫反应。枯萎病是由尖孢镰刀菌引 起的真菌病害，尖孢镰刀菌和寄主相互作用时分泌几个特定的富含半胱氨酸的小分子量蛋白(15．8—29．9 kD)进入木质部启动致病力 ，称为SIX(secretedinxylem)蛋白，其中，SIX6蛋白是一个效应蛋白。西瓜枯萎病 是由西瓜专化型尖孢镰刀菌 (Fusariumoxysporumf．sp．Niveurn，Fon)引起的真菌病害。为了明确 FonSIX6在 侵染西瓜时的作用，克隆了该基因的上下游序列 ，以潮霉素为筛选标记构建了该基因的缺失突变体载体 pDH．SIX6；将构建好的基因缺失载体转入农杆菌AGL一1中，通过农杆菌介导的遗传转化和转化子的筛选获得 了FonSIX6基因的缺失突变体。 关键词：西瓜枯萎病 ；FonSIX6；效应蛋白；缺失突变体；西瓜专化型尖孢镰刀菌 中图分类号：S436．5 文献标志码 ：A 文章编号：1004—1524(2013)02-0288-05 ConstructionofFonSIX6deletionmutantofFusarium oxysporum f．sp．niveurn TANGNing—an ，NIUXiao．wei，ZHANGYue．jian，SHOUWeisong2，FANMin (。CollegeofChemistryandLfieSciences，ZhejiangNormalUnweni~，Jinhua321004，China；InstituteofVegetables， ZhejiangAcademyofAgriculturalScnces，Hangzhou310021，China) Abstract：Duringtheinteractionsbetweenplantpathogen andhostplant，thepathogensecreteseffectorprotein to suppresshostdefenses．FusariumwiltisafungaldiseasecausedbyFusarium oxysporum，thefungussecretesseveral effectorproteinsintotheplantxylem topromotevirulence．Theseeffectorsaresmallmolecularcysteine—richproteins andcalledSIX(secretedinxylem)proteins，andtheSIX6wasoneofthem．Fusriumwiltofwatermelonwasapatho— genicfunguscausedbyFusariumoxysporumf．sp．niveurn(Fon)．TounderstandthefunctionofFonSIX6duringin— fection，theflankingregionofFonSIX6 wascloned andthedeletionmutantvectorofFonSIX6withhygromycinwas consturctedasaselectablemarker．Theconstructedgene de