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第 40 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究 第期
2012 年月 Chinese Journal of Analytical Chemistry ~
: /
DOI 10.3724SP.J.1096.2012.11206
全血直接扩增结合焦磷酸测序法测定
亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性
1 2,3 2 * 2,3
刘云龙 陈之遥 武海萍 周国华
1 ( )
中国药科大学生命科学与技术学院, 南京 2 10009
2 ( )
华东医学生物技术研究所, 南京 2 10002
3 ( ( ) , )
南京大学医学院临床学院 南京军区南京总医院 药理科 南京 2 10093
摘 要 亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C T 和 1298A C 两个位点的多态性与临床常用抗肿瘤药物甲氨
, 。
蝶呤及氟尿嘧啶的作用密切相关 对这两个位点多态性的检测能指导临床合理用药 为进一步缩短检测时
, , “ ”
间, 降低检测成本 本研究建立了基于全血直接 PCR 的焦测序检测方法 采用 HpH Buffer 直接扩增全血模
, 。
板 仅需 1 mL 全血样本即可对两个位点进行高效扩增 扩增产物经碱变性法制备单链模板后进行焦磷酸测
, , 。 ,
序 经过条件优化 仅需 5 mL 扩增产物和 1 mL 微球即可完成高灵敏的焦测序反应 为验证方法的准确性 检
, 。
测了 12 例临床样本 均能正确检测两个位点的基因多态性 本研究为临床基因多态性检测提供了一种操作
, 。
简便, 耗时短, 成本低, 准确度高的方法 该方法可用于指导甲氨喋呤和 5 氟尿嘧啶的个体化用药
-
; ; ;
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 基因分型 全血直
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