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可用于DMPK研究的干血点微量采样技术 展 进 述 综 药物代谢（DM），药代动力学（PK）和毒代动力学（TK）可为研究候选药物在体内的作用提供重要的线索，一直是 药物开发进程中的不可或缺的重要步骤。在传统研究中，血浆被认为相对于全血而言更容易处理、运输及储存。因此 常在临床实验中被用于新的化学药物的剂量研究和药代动力学研究。然而，在制备血浆的过程中，常需要大量的血液 （通常每个时间点的研究对象至少需要100-500微升）以制备足够的血浆用于定量生物分析。由于每只受试实验动物 能够被取血的次数和数量有限，有时研究者不得不使用多个动物的混合样品进行研究。这种混合样品会降低定量药代 动力学的数据质量，并且会间接增加所需实验动物的数量。此外，从全血中分离血浆用于生物分析往往需要使用固相 萃取、液-液萃取、蛋白沉淀等方法。这些方法往往存在着耗时、耗力、通量小的缺点，并且在实际操作中还需要考 虑和处理冷链运输、储存血液样本的要求。 干血点 (DBS)技术使用纸张进行血液样品的采集，是一项可克服以上不足的样品采集技术。运用干血点技术的Guthrie card自1970年起就被用于新生儿筛查。之前该项技术的应用主要受仪器灵敏度的限制无法进行定量试验，而检测方法 和仪器灵敏度的提高使得DBS越来越多的被用于药物筛选的检测和药代动力学研究。在2009年，GSK首先报道使用 Whatman FTA卡将DBS用于DMPK分析，线性 (Linearity) 、灵敏度 (Sensitivity) 、选择性 (Selectivity) 、准确性和精确 性 (Accuracy Precision) 等方面证明了干血点技术可成功应用于DMPK领域 [1] 。在2011年，他们再次验证了indicating FTA DMPK卡可用于DMPK分析[2]。继GSK之后，更多的药厂和科研机构将DBS-DMPK用于新药研发。罗氏制药在2010 年对其一种需要进行治疗监测及上市后临床研究的免疫抑制药物霉酚酸酯的活化形式霉酚酸(MPA)及其糖苷酸代谢物 MPAG分别使用DBS采样技术（Whatman FTA DMPK-B卡）及液体采样方式进行了比较实验。结果证明了DBS无论对全 血或血浆样品均可提供与液体采样方式媲美的数据质量 [3] 。同样在2010年，百时美施贵宝使用whatman 903卡和 Whatman FTA DMPK-B卡对两个体外不稳定的药物前提进行了稳定性研究，提示干血点技术科作为另一种药物前提 稳定性研究的样品采集方法及储存手段[4]。辉瑞制药在2012年尝试应用自动化干血点样品采集技术进行Wistar Han 大鼠样品达沙替尼代谢信息的解析并取得了成功，证实了干血点技术在通量化获取药物代谢信息的能力 [5] 。 DMPK卡的使用十分简便：首先将全血样品点在卡片上并让其自然干燥。随后使用打孔器在干燥后的血点上取少 量纸片，使用溶剂将样品洗下。随后进行后续生物学分析即可。 展 进 述 综 此外，DMPK卡还有指示卡的形式，这种指示卡可被用于无色透明样本的采集，如血浆、尿液、脑脊液等。当样品被 点样于指示卡上时，卡上蓝色指示剂会发生颜色的改变，使含样品的区域变为无色，方便进行辨识。 GE医疗集团生命科学部的干血点微量采集卡（FTA卡）使用特殊的whatman滤纸介质，可为来源于不同结构体的化合 物提供可控的批内、批间差异，得到精密、准确的数据。目前这项技术及产品已被广泛用于药代动力学和毒代动力学 研究. FTA DMPK-A 卡和FTA DMPK-B卡可对细胞结构进行裂解并将卡上的蛋白质变性。FTA DMPK-C卡则保留蛋白质 的本来性质。点样后的卡片可在常温下运输和储存，长期稳定。样品已被证明可用于血浆中代谢物的生物分析。 [1] N Spooner, R Lad and M Barfield. Dried blood spots as a sample collection technique for the determination of pharmacokinetics in clinical studies: considerations for the validation of a quantitative bioanalytical m