茶卷叶蛾寄生真菌球孢白僵菌几丁质酶基因的克隆与序列分析.pdfVIP

福建农业学报 26(4)：,507～512，2011 FujianJournalofAgriculturalSciences 文章编号：1008—0384 (2011)04—507—06 茶卷叶蛾寄生真菌球孢 白僵菌几丁质酶基因的克隆与序列分析 王定锋 ，曾明森 ，王庆森 ，刘丰静 ，吴光远 (福建省农业科学院茶叶研究所 ，福建 福安 355015) 摘 要 ：球孢 白僵菌是最重要 的虫生真菌之一 ，在农林害虫生防中发挥着重要 的作用 。本研究从茶卷 叶蛾球孢 白 僵菌 JYBb201—11菌株 中克隆了几丁质酶 Bbchitl基因(GenBank登录号：HQ435871)。根据 GenBank上 昆虫病原 真菌几丁质酶基 因序列 同源性设计 引物 ，分别进行 DNA—PCR和总 RNA-RT—PCR反应 ，对得到的 目的片段 ，回收 纯化后通过 PMD18一T载体转化到大肠杆菌 DH5a中，获得几丁质酶基 因序列 的重组质粒 PMD18一chit，并测序。 结果表明，DNA—PCR和总RNA—RT-PCR获得的基因序列完全一样，都是一个完整 ORF序列