环境空气飘尘中苯并（a）芘的测定乙酰化滤纸层析荧光.pdfVIP

FHZHJDQ0007 环境空气 飘尘中苯并(a)芘的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法 F-HZ-HJ-DQ-0007 环境空气—飘尘中苯并(a)芘的测定—乙酰化滤纸层析荧光分光光度法 1 范围 本方法适用于大气飘尘中苯并(a)芘[简称 B 〔a 〕P] 的测定。当采样体积为40m3 时，最低 检出浓度为 0.002µg/100m3 。 2 原理 B 〔a 〕P 易溶于咖啡因水溶液、环己烷、苯等有机溶剂中。将采集在玻璃纤维滤膜上飘 尘微粒中的 B 〔a 〕P 及一切有机溶剂可溶物用环已烷在水浴上连续加热提取、浓缩，用乙酰 化滤纸分离，B 〔a 〕P 斑点用丙酮洗脱，最后用荧光分光光度计定量。 样品应放在避光及暗处，或者用黑纸包好存入冰箱中。 3 试剂 3.1 B 〔a 〕P 标准溶液的配制：称取 5.00mg 固体标准B 〔a 〕P 于 50mL 容量瓶中(因B 〔a 〕 P 是强致癌物，为了减少污染，以少转移为好)用少量苯溶解后，加环己烷定容至标线。其浓 中 度为 100µg/mL。将此贮备液用环己烷稀释成 10µg/mL。避光贮于冰箱中。 3.2 乙酰化滤纸的制备：把 15cm×30cm 的层析滤纸 15～20 张，松松地卷成圆筒状，逐张 放入 1000mL 高型烧杯中，杯壁与靠杯壁第一张纸间插入一根玻璃棒，杯中间放一枚玻璃熔 国 封的电磁搅拌铁芯。在通风橱中，沿杯壁慢慢倒入乙酰化剂(750mL 苯，250mL 乙酸酐，0.5mL 硫酸混合液) ，在磁力恒温搅拌器上保持 50～60℃，连续反应 6h 。取出乙酰化滤纸，用自来 水漂洗 3～4 次，再用蒸馏水漂洗 2～3 次，晾干。次日，用无水乙醇浸泡 4h ，取出乙酰化滤 纸，晾干、展平，备用。 分 3.3 环己烷：重蒸，用荧光分光光度计检查。在荧光激发波长 367nm、狭缝 10nm 处，荧光 发射狭缝 2nm，波长405nm 无峰。 3.4 丙酮：重蒸。 析 3.5 乙醚。 3.6 苯：重蒸。 3.7 甲醇。 网 3.8 乙酸酐。 3.9 硫酸。 3.10 无水硫酸钠。 3.11 二甲基亚砜(DMSO) ：用前先用环己烷萃取两次，弃去环己烷后备用。 4 仪器 4.1 采样器及玻璃纤维滤膜，同 F-HZ-HJ-DQ-0156 大气—飘尘浓度的测定—重量法。采样体 积不大于 40m3 。玻璃纤维滤膜在350℃马弗炉内灼烧 1.5h。 4.2 带有紫外激发和荧光分光的荧光分光光度计。 4.3 紫外分析仪：带 365 或 254nm 滤光片。 4.4 磁力恒温搅拌器。 4.5 立式离心机：3000r/min 。 4.6 索氏提取器：60mL 。 4.7 KD 浓缩器。 4.8 具塞玻璃刻度离心管：5mL 。 4.9 层析缸。 4.10 玻璃毛细管：自制点样用。 4.11 十万分之一分析天平。 1 5 操作步骤 5.1 样品的萃取 将飘尘样品(玻璃纤维滤膜的尘面朝里折叠后)小心放进索氏提取器的渗滤管中(放时不要 让滤膜堵塞回流管) 。加入50mL 环己烷，置于温度为 99 ±1℃水浴中(水面以达到接收瓶高的 三分之二为宜)连续回流 8h。 根据提取液颜色深浅，取全部或将提取液转移到 50mL 容量瓶定容为 50mL 后，取部分 置于 KD 浓缩器中，在 70～75℃的水浴中减压浓缩至近干。浓缩管用苯洗三次，每次 3～4 滴。继续浓缩至 0.05mL 。以备纸层析用。 5.2 纸层分离 在准备好的 15cm×30cm 乙酰化滤纸 30cm 长的下端 3cm 处，用铅笔轻轻地画一横线， 两端各留出 1.5cm，以2.4cm 的间隔将标准B(a)P 与样品浓缩液用玻璃毛细管交叉点样。点样 斑点直径不要超过 3～4mm 。点样过程中用冷风吹干。每个浓缩管洗两次，每次用 1 滴苯， 全部点在纸上。将点完样的层析滤纸挂在层析缸内架子上，加入展开剂[ 甲醇：乙醚；蒸馏水 ＝4 ：4 ：1(体积比)] ，直到纸下端浸入 1cm 为止