槲皮素预处理对衣霉素所致巨噬细胞凋亡的抑制作用及机制.pdfVIP

生理学报 Acta Physiologica Sinica, February 25, 2013, 651: 47?54 47 http:// 研究论文 槲皮素预处理对衣霉素所致巨噬细胞凋亡的抑制作用及机制 1, 2, # 1, # 3 1 1 4 4 2,* 1,*姚树桐 ,苗 成 ,刘庆华 ,李妍妍 ,田 华 ,王芸芸 ,马变颖 ,方永奇 ,秦树存 1 2 3 4 泰 山 医 学 院 动 脉 粥 样 硬 化 研 究 所 , 山 东 省 高 校 重 点 实 验 室 ; 基 础 医 学 院 ; 附 属 医 院 检 验 科 ; 2008 级 生 物 技 术 本 科 , 泰 安 271000 quercetin, QUE tunicamycin, TM RAW264.7 摘 要 : 本文旨在研究槲皮素 预处理对内质网应激诱导剂衣霉素 所致 巨噬细胞凋 亡的抑制作用,并探讨可能的分子机制。体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20、40和80 μmol/L QUE 预处理30 min ,再加入 5 mg/L TM 12 h MTT Annexin V-FITC 继 续 培 养 。 分 别 采 用 法 和 双 染 法 检 测 细 胞 活 力 和 凋 亡 情 况 ; 免 疫 荧 光 细 胞 化 学 法 和 免 疫 印迹法检测转录激活因子6 activating transcription factor 6, ATF6核转位情况;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应 real-time PCR C/EBP C/EBP homologous protein, CHOP Bcl-2 mRNA 技 术 检 测 促 凋 亡 蛋 白 同 源 蛋 白 和 抗 凋 亡 蛋 白 蛋 白 及 表 达 变 化 。 结 果 显 示 ,QUE 40 和80 μmol/L 预 处 理 显 著 抑 制TM 所 诱 导 的 细 胞 活 力 降 低 和 凋 亡 。 与TM 处 理 组 比 较 ,QUE 预 处 理 ATF6 TM CHOP Bcl-2 组 内 质 网 应 激 感 受 器 由 胞 浆 向 核 内 转 移 明 显 减 弱 。 在 蛋 白 和 转 录 水 平 均 明 显 上 调 表 达 , 并 下 调 表 达 , 而 QUE 则 明 显 抑 制 上 述 变 化 , 且 呈 浓 度 依 赖 性 。 以 上 结 果 表 明 ,QUE 可 减 轻TM 所 诱 导 的RAW264.7 巨 噬 细 胞 凋 亡 , 可 能 是 部 ATF6-CHOP 分通过抑制 信号途径实现的。 C/EBP 关键词:槲皮素;内质网应激; 同源蛋白;衣霉素;巨噬细胞;凋亡 R331.3 R363.2 R332 中图分类号: ; ; Inhibitory effect of quercetin preconditioning on tunicamycin-induced apoptosis in macrophages and its mechanism 1, 2, # 1, # 3 1 1 4 YAO Shu-Tong , MIAO Cheng , LIU Qing-Hua , LI Yan-Yan , TIAN Hua , WANG Yun-Yun , MA Bian- 4 2,* 1,* Ying , FANG Yong-Qi , QIN Shu-Cun 1 2 3 Institute of Atherosclerosis, Key Laboratory of Atherosclerosis in Universities of Shandong; College of Basic Medical Sciences; De- 4 partment of Clinical Laboratory, Affiliated Hospital of Taishan Medical University; Grade 2008 of Biotechnology, Taishan Medical University, Taian 271000, China Abstract: The purposes of the present study were to investigate the inhibitory effect of quercetin QUE preconditioning on endoplas- mic reticulum stress ERS inducer tunicamycin TM-induced apoptosis in RAW264.7 macrophages and the underlying molecular mechanisms. RAW