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脂质体的制备及包封率的测定 沈阳药科大学 药物制剂实验教学中心 一、实验目的 1、掌握薄膜分散法制备脂质体的工艺。 2 、掌握用阳离子交换树脂测定脂质体包封率的 方法。 3、熟悉脂质体形成原理，作用特点。 4 、了解“主动载药”与“被动载药”的概念。 二、实验原理 脂质体是由磷脂与（或不与）附 加剂为骨架膜材制成的，具有双分子 层结构的封闭囊状体。 常见的磷脂分子结构中有两条较 长的疏水烃链和一个亲水基团。将适 量的磷脂加至水或缓冲溶液中，磷脂 分子定向排列，其亲水基团面向两侧 的水相，疏水的烃链彼此相对缔和为 双分子层，构成脂质体。 脂质体电镜照片 多室脂质体电镜照片 脂质体冷冻蚀刻电镜照片 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如大 豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂等；合成磷脂，如二棕 榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱等。 常用的附加剂为胆固醇。胆固醇与磷脂混 合使用，可制得稳定的脂质体，其作用是调节 双分子层的流动性，降低脂质体膜的通透性。 其他附加剂有十八胺、磷脂酸等。这些附加剂 能改变脂质体表面的电荷性质，从而改变脂质 体的包封率、体内外稳定性、体内分布等其他 相关参数。 脂质体的制备方法 脂质体的制备方法有多种，根据药物 的性质或研究需要来进行选择。 薄膜分散法 注入法 逆相蒸发法 冷冻干燥法 熔融法等 薄膜分散法 这是一种经典的制备方法，它可形 成多室脂质体，经超声处理后得到小单 室脂质体。此法优点是操作简便，脂质 体结构典型，但包封率较低。 注入法 注入法有“ 乙醚注入法”和“ 乙醇注入法” 等。“乙醇注入法”是将磷脂等膜材料溶于 乙醇中，在搅拌条件下慢慢滴入55-65℃含药 或不含药的水性介质中，蒸去乙醇，继续搅 拌1-2h，即可形成脂质体。 磷脂等膜材 水性介质 逆相蒸发法 系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂，如 氯仿、二氯甲烷中，再按一定比例与含药的缓 冲液混合、乳化，然后减压蒸去有机溶剂即可 形成脂质体。该法适合于水溶性药物、大分子 活性物质，如胰岛素等的脂质体制备，可提高 包封率。 在制备含药脂质体时，根据药物装载的机 理不同，可分为“主动载药” 与“被动载 药”两大类。 所谓“主动载药”，即通过脂质体内外水 主动载药 相的不同离子或化合物梯度进行载药，主要有 + + + K -Na 梯度和H 梯度(即pH梯度)等。 传统上，人们采用最多的方法是“被动载 药”法。所谓“被动载药”，即首先将药物溶 被动载药 于水相或有机相(脂溶性药物)中，然后按所选 择的脂质体制备方法制备含药脂质体。 “被动载药”的共同特点是：在装载过 共同特点 程中脂质体的内外水相或双分子层膜上的药 物浓度基本一致，决定其包封率的因素为药 物与磷脂膜的作用力、膜材的组成、脂质体 的内水相体积、脂质体数目及药脂比(药物与 磷脂膜材比)等。 对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高的药 物，“被动载药”法较为适用。而对于两亲 性药物，其油水分配系数受介质的pH值和离 子强度的影响较大，包封条件的较小改变就 可能使包封率有较大的变化，此类药物首选 “主动载药”方法。 inside