羧甲基魔芋葡甘露聚糖对L929细胞体外毒性研究.pdfVIP

416 2008, Vol. 29, No. 07 食品科学 ※营养卫生 羧甲基魔芋葡甘露聚糖对L929细胞 体外毒性的研究 1 2 吴海燕，陈颖 (1.南通农业职业技术学院，江苏南通 ；2.226007南通市通州食品药品监督管理局，江苏南通 226500) 摘 要：本实验选用L929小鼠成纤维细胞为靶细胞，用含不同浓度、不同取代度的羧甲基魔芋多糖的培养液， 通过体外细胞培养法进行细胞毒性检测，于24h后测其吸光度，计算细胞的相对增殖率，用6级毒性分类法评价 羧甲基葡甘露聚糖的细胞毒性。结果表明，羧甲基葡甘露聚糖各实验组的细胞增殖率(RGR)均在75%以上，而且 与阳性对照组有统计学差异(p＜0.01)，与阴性对照组没有统计学差异(p＞0.05)，细胞毒性为1级，无明显的细胞 毒性；羧甲基葡甘露聚糖的浓度对L929细胞活性的影响显著。 关键词：MTT法；羧甲基魔芋葡甘露聚糖；细胞毒性 in vitro 1 2 WU Hai-yan，CHEN Ying a； Abstract：Thein vitro ＞ the positive group (p＜ Key words：MTT-assay；carboxymethyl konjac glucomannan；cytotoxicity 中图分类号：TS201.6 文献标识码：A 文章编号： 魔芋葡甘露聚糖分子链上的部分羟基被羧甲基取代 能将淡黄色可溶性的MTT还原成紫色结晶状物质，经 后，其产物羧甲基葡甘露聚糖(CMKGM)以盐的强烈亲 有机溶剂二甲基亚砜(DMSO)的作用，结晶溶解显色， 水性而极易溶于水，水溶液透明、细腻、流动性好， 颜色的深浅可反映活细胞数量的多少。因此，四唑盐 具有一定的黏性，而且不易受温度、pH值、时间的 比色法能够十分灵敏地反映细胞毒性程度，己被广泛应 [1] [4] 影响，稳定性、成膜性能大大提高 。CMKGM对机 用于生物相容性的评价 。 体是否构成损害或引起毒性反应，是人们普遍关心的问 本实验通过用不同取代度、不同剂量的CMKGM， 题，因此，必须对其生物安全性进行评价。 体外培养L929小鼠成纤维细胞24h后，观察细胞形态、 国内外对CMKGM的制备工艺优化的探讨比较多， [3] 并检测L929的MTT值 ，研究CMKGM的细胞毒性， 但对于CMKGM的生物安全性评价的研究还未见报道。 为CMKGM的进一步应用提供实验基础。 ISO10993-5:1999和GB/T16886.5－2003标准中对生物材料 1 材料与方法 的安全性评价制定了严格的标准，细胞毒性试验被列为 [2-3] 生物安全性评价的第一阶段的筛选实验 。目前国内外 1.1材料与试剂 广泛用于评价细胞毒性的方法——MTT(四唑盐)比色法， CMKGM实验室自制；阴性对照：RPMI1640 它的基本原理是活细胞中处于细胞色素的线粒体脱氢酶 (GIBICOL公司)，阳性对照：6.4ml/L苯酚。 收稿日期：2007-09-07 作者简介：吴海燕(1978-)，女，硕士研究生，主要从事食品营养与安全的研究。E-mail：why022@126.c