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- 2017-09-13 发布于重庆
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病毒的分离培养鉴定和血清
学检测
一 病毒的鸡胚接种法
病毒需严格细胞内寄生,培养病毒必须在
活的动物、鸡胚或细胞内进行。新城疫病
毒(NDV)、流感病毒(IFV)等对鸡胚培
养敏感,因此常用鸡胚接种法分离培养
NDV、IFV等。目前对IFV的疫苗制备就是
在鸡胚培养中进行的。由于NDV、IFV在鸡
胚内培养时并不引起明显的鸡胚病变或死
亡,常用血凝和血凝抑制试验对病毒进行
鉴定。
(一)接种方法
1)孵育9~11天左右的鸡胚,在照蛋灯下用
蜡笔标出气室和胎位;
2 )鸡胚直立于蛋盘上,气室端向上,按常规
以碘酒,酒精消毒;
3)在避开鸡头和大血管的位置,用磨蛋器在
气室中央磨一小孔,再用碘酒擦拭消毒;
4 )用1ml注射器吸取NDV悬液,针头从气室
小孔刺入(沿胚胎的长轴刺入)0.5--1cm
深度;此时针头已在尿囊腔中,注入0.2ml
病毒悬液;
5)拔出针头,用镊子将小胶布蘸取酒精烧灼
后封闭小孔,置于35~36℃温箱内培养,其
中翻动两次,用照蛋灯检视一次,36小时
后置-20℃冰箱20分钟后,无菌操作收获尿
囊液。
鸡
胚
的
检
卵
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