ISSR分子标记对9种狗牙根的鉴定分析.pdfVIP

第 21卷 第 6期 草 业 学 报 159— 165 Vo1．21，No．6 ACTA PRATACULTURAESINICA 2012年 12月 ISSR分子标记对 9种狗牙根 的鉴定分析 刘君，赵琴，杨志民 (南京农业大学草坪研究与开发工程技术中心，江苏 南京 210095) 摘要 ：狗牙根是全球最重要 品种最丰富的暖季型草坪草种之一 ，种或品种 间形态相 同，传统 的形态学方法、田间区 试法等不能准确作出鉴定 ，ISSR分子标记被认为是 目前准确高效 的品种鉴定技术。本试验以9种常用狗牙根为对 象 ，利用 ISSR标记技术对 9份材料 间的遗传多样性进行 了研究，构建 了9份材料的指纹 图谱 。由ISSR标记分析 结果可知，13条引物组合共获得 54条清晰可辨的总条带，多态性条带数 34条 ，平均每对引物扩增 出4．1条带，多 态性位点百分率为 64．15 ，品种间的遗传相似系数 (Gs)范围在 0．547～0．962，变幅为 0．415，说 明供试材料具有 比较丰富的遗传多样性 。UPGMA聚类分析结果表 明，GS=0．806时，9种常用狗牙根品种可聚为 5类 。黑杰克和 南京狗牙根为第 1类 ，普通狗牙根和瑞拉第 2类 ，阳江狗牙根为第 3类 ，摄政王为第 4类 ，T一419、小矮人 、老鹰草为 第 5类 。利用 ISSR引物 UBC810和 UBC857的扩增产物电泳 图为基础构建的指纹图谱可以鉴定出9种狗牙根 品 种 。 关键词 ：狗牙根 ；品种鉴定；ISSR；聚类分析 ；指纹 图谱 中图分类号：$543 ．901 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—5759(2012)06—015907 狗牙根 (Cynodon)又名绊根草 、百慕大草 ，属禾本科狗牙根属多年生草本植物_1]，具有繁殖力强 、抗旱 、耐践 踏 、质地细腻 、色泽好等优 良特性 ，广泛用于高尔夫球场、足球场和城市绿化 ，是全球暖季型草坪草中坪用价值最 高、应用最广泛的草种之一 。近年来随着狗牙根市场应用 品种的增多，出现 了品种混淆、甚至一些不法商贩为了 渔利而以次充好 、冒名顶替的现象，影响了品种特定设计功能的发挥，法律纠纷案件时有发生。传统 的品种鉴定 主要采用形态学方法、田间小区法等方法 ，这些方法都不同程度地存在缺陷。ISSR是 Zieticwiez等 于 1994年 提出的一种利用 PCR扩增进行检测的DNA标记。具有稳定性好、多态性丰富、成本低、操作简单等特点_4]，该 技术在植物遗传多样性分析和品种鉴定 中得到广泛应用 ]，刘伟等r6利用 ISSR分子标记技术对西南 区野生狗 牙根进行遗传多样性分析，能够将西南区45份材料区分开 ，并将供试材料聚为4类 ，材料间的遗传关系与其地理 来源问没有严格的一致性关系。王文恩等 利用 ISSR技术对辐射诱变的7个变异植株和7个常用品种 14份狗 牙根进行分析 ，在遗传相似系数 (Geneticsimilaritycoefficient，GS)为 0．654处时 ，14份狗牙根材料可分为 3个 类群 。材料间的遗传相似系数为 0．585～O．776，遗传差异性 比较明显 。周少云等_8利用 ISSR技术对广东地区 野生狗牙根进行遗传多样性分析，材料 间遗传系数 GS一0．582～0．927，聚类分析结果表 明，将供试材料聚为 4 类。在品种鉴定方面，胡雪华等_9采用 ISSR分子标记技术 ，对上海结缕草 (Zoysiajaponica)JD一1与大面积草坪 绿地所选用的结缕草属的3个种初步建立了指纹图谱 ，结合 4个材料的主要形态特征分析 ，可以明确上海结缕草 JD-1是一个新的不同于结缕草、沟叶结缕草 (Zoysiamatrella)和细叶结缕草 (Zoysiatenuifolia)的结缕草新品 系。Fang和 Roose_l】。。用 ISSR标记区分亲缘关系很近的柑橘属不同品种 ，通过 22个引物产生 的ISSR标记可用 于区分 68个柑橘 (Citrusreticulata)品种 。Prevost和 Wilkinson川【采用 4条引物研究 了 34个马铃薯 (Solanum tuber