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中国预防医学杂志 年 月第 卷第 期 · ·
２０１２ １０ １３ １０ ＣｈｉｎＰｒｅｖＭｅｄ Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１２ Ｖｏｌ．１３Ｎｏ．１０ ７４７
· ·
论 著
定点诱变法构建 地中海贫血ＩＶＳ （ ）
２ ６５４Ｃ Ｔ
β － － ＞
突变基因质粒
１ ２ ３ １ １
， ， ， ，
余玲玲 田可港 冯晶晶 王慧燕 郑晓群
， ；
温州医学院附属第二医院检验科 浙江温州
１． ３２５０２７
温州医学院检验与生命科学学院； 杭州市滨江医院病理科
２． ３．
： （ ） （ ） 。
摘要 目的 构建含 地中海贫血 简称 地贫 ＩＶＳ２６５４ Ｃ Ｔ 突变基因的质粒 方法 以含 珠蛋
β β － － ＞ β
白野生型基因的质粒 ， （ ）
ＤＮＡ为模板 采用重叠延伸 ＰＣＲ ＯＥ ＰＣＲ 定点诱变后行 ＴＡ 克隆的方法构建含
－
（ ） 。 ： （
ＩＶＳ２６５４ Ｃ Ｔ 突变基因的质粒 结果 双向测序结果表明 重组质粒的确含 地贫 ＩＶＳ２６５４ Ｃ
－ － ＞ β － － ＞
） ， ， ，
突变基因 珠蛋白 处的碱基已由 突变成 其余序列与野生型完全相同 成功实现了定
Ｔ ＩＶＳ２６５４
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