pCDNA3-PTH真核表达载体构建及其在细胞内表达.pdfVIP

畜牧与兽医 2008年 第40卷 第 l0期 ．一…一试一一一研究一=一一一一一 pCDNA3．PTH真核表达载体构建 及其在细胞内表达 俞 路，章世元 ，王雅倩，刘 波，李治学， 周联高，严桂芹，汪益峰，林显华 (扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225009) 摘要 ：以鸡甲状旁腺组织中总RNA为模板，采用RT—PCR法获得甲状旁腺素 (PrH)cDNA。将该基因克隆至pCDNA3载体中，构建真核细胞表 达载体pCDNA3一PrH，DNA测序证明获得了 H基因，其序列与GenBank报道序列比较，核苷酸同源性为99，4％，在第 159位处存在 c—A的有 意义突变。将测序正确的 H基因在多聚乙肽亚胺 (PEI)介导下转染COS—l细胞，通过间接免疫荧光试验 (IFA)检测到了PTH在 COS一1中的 表达。PTH基因克隆和表达均获得成功，为进一步探讨该基因在改善蛋壳