激素配比对白桦悬浮细胞中三萜积累的影响.pdfVIP

Dec．2008，Volume2，No．12(SerialNo．13) JournalofAgriculturalScienceandTechnology,ISSN1939-1250，USA 激素配比封 白棒慝浮细胞中三萜稹累的影窖 筢桂枝，詹亚光，王 博，翟俏麓 (柬北林棠大擎生命科学学院，黑能江哈前清 150040) 摘 要：以白樟 (BetulaplatyphyllaSuk．)组培苗诱尊的愈俦组绒属研究材料，在培餐周期内，在 Is 培奏基上附加不同檀颧和漾度的激素，靓察不同激素组合封白样憨浮细胞生畏及其三萜稽累的燮化。结果 表明，在 12往激素组合 中，0．4mgL·’6-BA+0．2mg-L。TDZ培委下的三萜座量最高，遣 0．21gL‘(DW)。 由此，建蕺有利于三萜稽累的激素组合和漾度属 0．4mgL·一6．BA+0．2mgL·～TDZ。 阴键匍 ：白样 ；题浮细胞 ；激素 ；三萜 广=1样 (Betulaplatyphylla Suk．)树 皮 中含 系，初步探讨激素配比舆三萜植累的嗣系。 l5％～25％左右的白榫酯醇等三萜化合物 l【j，白样酯 醇 以及 由白棒酯醇耱化的次级廑物 白样酯酸及其 1．材料舆方法 衍生物具有镇咳祛痰 ，清热利瀑，消艟解毒，提高 楼休免疫力，降血脂等作用[2-3]。更重要的是 白棒酯 1．1愈俦组绒 的 尊材料 醇、白样酯酸等三萜化合物作属天然蘖物在抗膻瘤 愈俦组绒的 尊材料届白样组培苗茔段，培善 和抗 HIV 等活性上颢示出了舆 以往蔡物不同的作 基局IS+0．8mgL·～6一BA+0．6mgtL～NAA。 用横制，靶向作用性更强，不 良反虑较小I4J。因此 ， 1．2愚浮培善傺件 白样三萜物蜇作届最有潜力的新型蕖物制剖，具有 愍浮培善基局Is培善基附加20gL／蔗糖，pH值 庚阔的虑用前景。 魇6．0～6．5。接獯瓶扇 100mL三角瓶，每瓶分装 50mL 白样三萜的獾得大都 白棒树皮中提取和分 培善液，每瓶接槿 1g鲜重的白样愈俦组减 。每 7d 靛 ，逭檬不僮造成 白榫资源的破壤，而且作届新型 更换一次培善液。培善基均以121℃高壁减菌20min， 檠剂的酶床研究，特别是推磨虑用的敷量受到限 培眷温度禺 23～25~C，光照强度届 2000Ix，光照 16 制。而大规模植物细胞培善技钭亍因具有不受地匾、 h／cl-，瀑度局65％左右，感浮培蓄的辖速焉100r-min～。 季简、资源的影馨，不破壤瑗境，通遇 自勤化控制 1．3激素配比 (兄表 1) 细胞生畏和合理羽筋代谢遇程柬降低成本和提高 1．4 细胞活力 的测定采用氯化三苯 四氮唑 生座率等僵黠已成届植物蔡品的新柬源 6【]。在 园内 (TTC)法 。【】 柬北林柴大孥率先朗展了白榫组绒培善技衍和繁 1．5三萜含量的测定采用紫外分光光度 法。 育横理的研究 ，建立起雨檀高效的白样组培 髓再 以齑墩果酸焉檩辈檬品，以5％香草醛．冰乙酸溶液、 生途径一腋芽增殖途径和愈 组绒途径L7J。同睛， 高氯酸餍颞色系统rⅢJ 笔者寅聆室遗初步建立了白棒的慝浮培善髓系。扇 1．5．1给制三萜含量的檩犟曲缝 了利用细胞工程手段大规模生麈白棒三萜，本弑腧 将齑墩果酸配制成溃度焉0,2mg．m 的檩辈储 以白样 性系苗诱尊的愈俦组缴羁研究材料 ，在 白 借液。徒中取0．1、0．2、0_3、0．4、0．5、0．6mL分别 棒愍浮培善僚件下，觏察不同激素组合及濂度封 白 置于玻璃弑管中，加熟择骠溶剖，加入0．2mL新配 样戆浮细胞的生畏状况和内部三萜含量横累的网