Zfp521在大鼠骨髓间充质干细胞向神经元分化过程中的表达变化及意义.pdfVIP

· 326 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(2)：326—331 [文章编号] 1000—4718(2012)02—0326—06 ZfpS21在大鼠骨髓间充质干细胞 向 神经元分化过程中的表达变化及意义 韩 瑞 ， 周 燕 ， 王舒阳 ， 张广宇 ， 彭 越 ， 王翠琴 ， 鲁晶晶 ， 彭 涛 ， 贾延劫 (郑州大学第一附属医院 神经内科，放射科 ，河南 郑州450052) [摘 要] 目的：探讨锌指蛋白521(Zfp521)在大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元过程中的表达变化及意 义。方法：体外培养大 鼠MSCs，实验分为未转染组、转染组(转染Rn—Zfp521一siRNA)和阴性对照组(转染nega- tivecontrolsiRNA)，采用B一巯基乙醇诱导骨髓间充质于细胞分化为神经元。倒置荧光显微镜下观察 MSCs转染 后荧光表达情况。采用免疫细胞化学法、RT—PCR法及 Westernblotting法检测诱导后神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和微管相关蛋白2(MAP一2)的表达情况及诱导前、后Zfp521的表达变化。结果：(1)siRNA转染72h荧光 表达最强，转染率可达84．1％ ±2．3％，转染组骨髓间充质干细胞的Zfp521mRNA表达下降(P0．05)；(2)31一巯 基乙醇可以诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元 ，以转染组诱导效果最佳 ，NSE和MAP一2表达显著高于其它各 组 (P0．05)；(3)Zfp521在各组细胞中均有表达，诱导后 Zfp521表达明显低于诱导前 (P0．O1)。结论 ：z~521 在大鼠骨髓问充质干细胞神经分化中表达下降，抑制Zfp521表达可促进神经元的分化 ，提示Zfp521在骨髓间充质 干细胞的神经分化中可能发挥重要调控作用。 [关键词] 锌指蛋白521；骨髓间充质干细胞；诱导；神经元 [中图分类号] R329．21 [文献标志码] A dot：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．02．025 EffectofZfp521expressionondifferentiation ofratbonemarrow mesen- chymalstem cellsintoneurons HAN Rut，ZHOUYan ，WANGShu—yang ，ZHANGGuang—yu ，PENGYue ，WANG Cut—qin，LUJing—jing，PENGTao，JIAYan—jie (DepartmentofNeurology，DepartmentofRadiology，FirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052， China．E—mail：fiayanjie1971@yahoo．com．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofzincfingerprotein521(Zfp521)onthedifferentiationofratbone marrowmesenchymalstemcells(MSCs)intoneurons．METHODS：RatMSCswereculturedbyconventionalmethodin vitroanddividedintonon—transfectiongroup，transfectiongroup(transfectedwithRn—Zfp521一siRNA)andnegative controlrgoup(transfectedwithnegativecontrolsiRNA)．MSCswereinducedbyB—mercaptoethanol(p—ME)todiffer— entiateintoneurons．Thefluorescenceexpressed by transfected MSCswasobservedunderinvertedfluorescencemicro— scope．TheexpressionofZ