内皮素-3对A375人类恶性黑素瘤细胞株骨桥蛋白基因表达的影响.pdfVIP

第 37卷第 6期第 720页 华中科技大学学报 (医学版) Vo1．37 No．6 P．720 2008年 12月 ActaMedUni、rSciTechnolHuazhong Dec． 2008 内皮素一3对 A375人类恶性黑素瘤细胞株 骨桥蛋 白基因表达的影响* 田 进 黄长征。△ 刘业强。 李 延。 陶 娟 李家文 涂亚庭 沈关心。 华 中科技大学同济医学院附属协和医院 感染性疾病科 !皮肤科 ，武汉 430022 华 中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系，武汉 430030 摘要 目的 研究 内皮素 3(ET3)对 A375人类恶性黑素瘤细胞株骨桥蛋 白(OPN)基 因表达的影响。方法 体外 培养 A375细胞株 ，分别设立对照组，ET3不 同浓度 (1、10、100nmol／L)实验组和ET一3同一浓度(100nmol／1)不同时间 (6、12、18、24、30、36h)实验组，采用 RT—PCR和 Westernblot结合吸光度分析技术检测骨桥蛋 白基 因表达情况 。结果 不同浓度 的ET3能显著上调A375细胞株骨桥蛋白基因表达 ，与对 照组 比较差异有统计学意义 ，并且这种 E调效应呈剂 量依赖性 。不 同浓度干预组组间比较差异有统计学意义。在 100nmol／LET一3浓度条件下，随着培养时间的延长 ，OPN 的表达逐渐增加 ，24h达到高峰，随后缓慢下降，RTPCR结果吸光度分析显示各时间段实验组与对照组 比较差异均有 统计学意义(均 PO．05)，6、12、18、24h实验组组间比较除6h和 12h组问差异无统计学意义外，其余各组组问差异均 有统计学意义，24、3O、36h实验组组间比较差异有统计学意义 。Westernblot吸光度分析显示各时间段实验组 与对照 组 比较差异有统计学意义，6、12、18、24h实验组组间以及 24、3o、36h实验组组间比较差异有统计学意义 。结论 ET一3 能时间和剂量依赖性地上调 A375细胞株骨桥蛋 白基 因的表达 。 关键词 黑色素瘤 ； 内皮素 3； 内皮素受体 B； 骨桥蛋 白 中图法分类号 R349．7 DOI：10．3870／j．issn．1672-0741．2008．06．005 TheEffectsofEndothelin-3on theExpressionofOsteopontin GeneinA375 HomanM elanomaCells TianJin ，HuangChangzheng扒 ，LiuYeqiang etal DepartmentofIn／ectiousDiseases，DepartmentofDermatology，UnionHospita1．TongjiMedicaI College，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430022 Abstract Objective ObjectiveToinvestigatetheeffectsofendothelin一3(ET一3)ontheexpressionofosteopontininA375 humanmelanomacells．M ethods CulturedcellswereincubatedwithdifferentconcentrationsofET一3fordifferentdurations． TheRT—PCR andW esternblotanalyseswereusedtoevaluatetheeffectsofET一3ontheexpressionofosteopontin ． Results Ascompar