日本血吸虫尾蚴66～68kD单特异性血清对尾蚴cDNA文库的免疫学筛选.pdfVIP

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2017-09-12 发布于湖北
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日本血吸虫尾蚴66～68kD单特异性血清对尾蚴cDNA文库的免疫学筛选.pdf

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中大学学报 ‘学版南 JC ) 200 entSouthUniv(MedSc) 8一，33(、1…2) lO76 Cent · ARTICLES · ·论著 · 日本血吸虫尾蚴66～68kD单特异性血清对尾蚴 cDNA文库的免疫学筛选秦永华，周帅锋，汪世平，高冬梅，余路新，李林 (中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室，长沙410078) [摘要] 目的：获得日本血吸虫(Sch~tosomajaponicum，sj)尾蚴 66～68kD抗原的编码基因，为日本血吸虫疫苗和诊断研究提供材料。方法：以sj尾蚴 66～68kD抗原免疫家免获得的单特异性血清为探针，对 sj尾蚴 cDNA文库进行免疫筛选，将所获阳性克隆的插入片断进行 PCR扩增、琼脂糖电泳初步鉴定。并挑选出4个强阳性克隆进行测序，通过互联网NCBI／BLAST进行核苷酸序列分析。结果：共获得 21个持续阳性克隆，其中10个阳性克隆初步鉴定显示为单一扩增条带，且插入的 cDNA片段大小分布于0．5～3．0kb之间；4个强阳性克隆分别与日本血吸虫 SJCHGC05187，SJCHGC05173，SJCHGC06989， SJCHGCO1894显著同源。结论：获得了4种日本血吸虫相关的编码基因。 [关键词] 日本血吸虫；尾蚴； cDNA文库；免疫筛选；基因 [中图分类号] R383．24 [文献标识码] A 【文章编号] 1672—7347(2008)12—1076-06 Immuno-screeningofSchistosomajaponicum cercariaecDNA library bytheseraofanti-solublecercariae66—。68kD antigens QINYong—hua，ZHOUShuai—feng，WANGShi—ping，GAODong—mei，YULu—xin，LILin (DepartmentofParasitology，XiangyaSchoolofMedicine，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China) Abstract： Objective ToobtainthecodinggenesrelatedtoSchistosomajaponicum (sj)cer— cariae66 ～68 kD antigens．and to provide antigensfordiagnosisand vaccineofschistosomiasis． Methods sjcercariaecDNA librarywasscreenedusingthemonospecificanti—seraofrabbitagaist solublecercariae66～68kD antigensasprobes．TheinsertedcDNA fragmentsofthepositiveclones wereamplifiedwith PCR andidentifiedbyagarosegelelectropho