南京椴组织培养快繁体系的建立.pdfVIP

江苏农业科学 2008年第6期 一 87一 南京椴组织培养快繁体系的建立 汤诗杰 ，李乃伟 ，汤庚国 (1．江苏省中国科学院植物研究所／南京中山植物园，江苏南京 210014；2．南京林业大学资源与环境学院，江苏南京210037) 摘要：以南京椴带腋芽幼嫩茎段为外植体，研究南京椴组织培养中外植体选择、芽的诱导、继代增殖和生根诱导技术。结果表明， 南京椴的最适外植体来 自一年生种子苗。运用正交试验筛选出南京椴腋芽诱导的培养基为MS+6一BA0．2mg／L+KT0．05mg／L+ IBA0．02mg／L+GA30．1mg／L；继代培养基为：MS+6一BA0．3meZL+IBA0．02me／L+GA30．3rag／L；生根培养基为MS+6一BA 0．05mg／L+IBA 1．0mg／L。 关键词 ：南京椴；组织培养 ；正交试验；芽的诱导；继代增殖 ；生根诱导 。 中图分类号 ：$792．36 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2008)06—0087—02 南京椴(TiliamiquelianaMaxim)属椴树科椴树属落叶乔 ℃，光照时间16h／d，光强2000lx。观察芽诱导情况，30d后 木，既是优 良的用材树种和重要的蜜源植物，又是集观树形 、 统计分化率和新梢高。通过软件正交设计助手 ⅡV3．1分析 树姿、树干、叶片、花及花序为一身的优良园林观赏树种，可用 数据，筛选出最佳培养基。 作行道树 、庭阴树、小区绿化的骨干树种等。南京椴的茎皮纤 1．2．4 继代与增殖 调整初代培养基激素水平，通过正交试 维可制人造棉，叶、花含少量挥发油、黏液质、苷类等。野生资 验k(3)重新设计9个培养基组合。将初代生长30d后的 源稀缺，加上其种子休眠期长，发芽率低 ，繁殖困难 ，因此 南京椴嫩梢切割后接入9种培养基中，每个茎段带 1个新腋 现有南京椴资源非常缺乏。而到目前为止，关于椴树科植物 芽。每瓶3个茎段，每种培养基接5瓶，重复3次。观察芽增 组织培养的研究很少”“，南京椴组织培养技术尚未见有研 殖情况，30d后统计增殖率。通过软件正交设计助手 ⅡV3．1 究报道。本试验建立了南京椴组织培养离体快繁体系，旨在 分析数据，筛选出最佳培养基。 为南京椴的保护和开发利用提供理论依据。 1．2．5 根的诱导 将长至3．0—4．0cm高的南京椴试管苗 切段后分别接入6种生根培养基：(1)MS+6一BA0．05mg／L 1 材料与方法 +NAA0．5mg／L；(2)MS+6一BA0．05mg／L+NAA 1．0 1．1 试验材料 mg／L；(3)MS+6一BA0．05m L+NAA1．5mg／L；(4)MS+ 分别取一年生实生苗、三至四年生实生苗和多年生大树 6一BA0．05mg／L+NAA2．0mg／L；(5)MS+6一BA0．05 基部萌蘖当年生枝条上带腋芽的茎段作为外植体。取材时 mg／L+IBA0．5mg／L；(6)MS+6一BA0．05mg／L+IBA 1．0 间：2007年4月。 mg／L。观察生根情况，从中筛选出诱发根生长的最佳培养基 1．2 试验方法 配方。 1．2．1 外植体表面消毒 将带腋芽的当年生枝条用清水冲 2 结果与分析 洗干净，加洗衣粉漂洗 1次，再用 84消毒液在摇床上振荡消 毒 l5～20min。流水冲洗 20～30min后，于无菌操作台上用 2．1 不同外植体对南京椴腋芽分化的影响 75％乙醇消毒50～60s，立即倒入0．1％的升汞消毒 10min， 3种不同来源外植体诱导中存在明显差