黄酮类化合物抗鼠肝微粒体脂质过氧化作用的结构与活性关系.pdfVIP

维普资讯 Vo1．24 高 等 学 校 化 学 学 报 No．12 2003年 12月 CHEM ICAL JOURNAL OF CHINESEUNIVERSITIES 2221～ 2223 [研究简报] 黄酮类化合物抗 鼠肝微粒体脂质 过氧化作用的结构与活性关系 蒋惠娣 ，方伟杰 ，傅旭春。，刘凤兰 ，胡永州 (1．浙江大学药学院．杭州 310031；浙江大学城市学院药学系 ．杭州 310015) 关键词 黄酮 ；肝微粒体 ；脂质过氧化 ；构效关系 中图分类号 0626 文献标识码 A 文章编号 0251—0790(2003)12-2221—03 黄酮类化合物具有多种药理作用．由于该类化合物种类多 ，生物活性差别大 ，研究其抗氧化活性 与结构的关系，将为寻找活性更强的黄酮类物质提供依据．研究表 日月[¨，黄酮类化合物抗氧化活性与 下列结构因素有关 ：黄酮母核上的羟基数 目及位置 ；B环上是否有邻二羟基 ；C环 2，3位是否有双键 结构，4位是否有羰基结构；3，5位是否存在羟基．由于不同研究者所研究的黄酮结构差异较大，目前 所得到 的抗氧化作用 的构效关系并不十分一致 ，上述关系也不能全面概括黄酮类抗氧化作用的构效关 系．黄酮类化合物抗氧化活性不仅与其结构有关 ，还与氧 自由基 的种类有关 ¨．OH’是活性最强 的氧 自由基 ，对生物体的损伤主要通过诱发生物膜上不饱和脂肪酸的脂质过氧化 (LPO)来实现，因此黄酮 类化合物对 OH。引发的生物膜 LPO 的抑制活性更能反映其生物学功能．本研究采用 OH’诱发 的大 鼠 肝微粒体 LPO模型 ，观察黄酮类化合物 的抗氧化活性 ，以阐述黄酮类抗 LPO活性 的构效关系． 1 实验部分 1．1 材料 化合物 1，2，3，12，13购 自中国药品生物制品检定所，化合物 4为 Sigma产品．化合物 5～11由浙江大学药学院药物研究所合成． 1．2 肝微粒体的制备 SD雄性大 鼠(220~250g)，用PEG法制备肝微粒体． 1．3 黄酮类化合物对微粒体 LPO 的作用 在蛋 白含量为 1mg／mL的微粒体 中，加入不同浓度黄酮、 FeSO4(4ptmol／L)与 Vc(50ptmol／L)，总体积为 1mL，37C孵育 30min，以三氯 乙酸沉淀蛋 白，用 TBA法测定 LPO产物丙二醛含量 ，计算 IC 1．4 计算方法 用半经验 自洽场分子轨道 AM1法[2]计算前线分子轨道能级、原子净 电荷和生成热等 量子化学参数．首先选择标准几何构型作为初始构型 ，然后进行全几何构型优化．母体和 自由基 的量 子化学计算均采用 限制性 HartreeFock法 (RHF)．计算脱去一个氢原子的 自由基的生成热时，选择脱 去使形成的 自由基最稳定的氢原子．计算表 明，脱去 4位氢原子的 自由基最稳定；当不存在 4位氢原 子时，脱去 7位氢原子 的 自由基最稳定． 2 结果与讨论 本文研究的黄酮类化合物结构见 Scheme1．这类化合物可 以分为两大类 ：第 1类在 B环的3和 4 位上均有羟基 ，第 2类在 B环 的3和 4位上没有 oH或只有 1个 oH．与其它研究者所得 出的结论叫相 同，B环上具有 3和 4-邻二羟基结构的第 1类化合物的抗氧化活性明显高于缺乏这种结构的第 2类化 合物．3和 4位上的两个羟基 由于形成分子 内氢键 ，削弱了羟基 中氢原子与氧原子的化学键强度 ，降 低 了脱氢形成 自由基的活化能；同时，脱氢后的氧原子可 以与邻位的羟基形成分子 内氢键 ，从而获得 额外的稳定化能，降低 了反应的AG值(Gibbs自由能改变)．因此，无论从化学动力学还是从化学热力 收穑 日期 ：200210—15． 基金项 目：浙江省中医药局重点项 目(批准号 ：资助 ． 联系人简介 ：蒋惠娣 (1965年出生)，女．硕士．副教授 ，从事天然药物活性研究．E—mail：hdjiang@,zju．edu．cn 维普资讯