双歧杆菌脂磷壁酸抗体的制备及其在双歧制品中的检测应用.pdfVIP

中国微生态学杂志 2008年 12月第 2O卷第6期 521 文章编号：loo5．376x(2008)o6 521_03 【论 著】 双歧杆菌脂磷壁酸抗体的制备及其在双歧制品中的检测应用 褚巧芳 。张德纯 (重庆医科大学 临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室；病原微生物学教研室，重庆 4O0016) 【摘要】 目的 制备双歧杆菌脂磷壁酸抗体并用以检测双歧制品中脂磷壁酸和双歧杆菌活菌的含量。方法 提取两歧双歧杆菌脂磷壁酸，加甲基化牛血清白蛋白与佐剂免疫预先已用卡介苗进行多克隆激活的BALB／c小 鼠，间接EusA法检测抗体效价与特异性，用免疫血清经双抗体夹心EusA法和免疫结合微量培养的方法分别检 测酸奶中脂磷壁酸和双歧杆菌活菌量。结果 免疫血清最高效价可达 l：1280，与所测其他人体双歧杆菌种属存在 较强交叉反应 ，与非双歧杆菌种属无交叉反应。对于脂磷壁酸和双歧杆菌活菌的含量检测取得 良好结果 ，检测线 可达 10cFU／lIll。结论 以双歧杆菌脂磷壁酸制备免疫血清，效价高，属特异性好 ，可用于双歧食品中脂磷壁酸和 双歧杆菌活菌的含量检测。 【关键词】 双歧杆菌；脂磷壁酸；EusA；应用 【中图分类号】R446．5 【文献标识码】A PreparatiOn0fanti-bifidObacterialipOteichOicacidantibOdiesandtheirapplicatiOnin thedetectiOnOfbiIidusprOducts CHUOiao—fang．ZHANGDe—chun (z PrD懈 一胧n￡ c0一D n d研 Dm￡D c2n 60 0，y 船 (胍 删ed n 啪 · ￡n)；脚 口胧m 砌 ^9 肘 r00 肌 m， Dn朗 姗 d ＆ ， ，C ， 4Ooo16， ，l口) A【bstract】 Objective I10preparep0lycl0nalamibodiesagainstpurifiedlip0teichoicacid(LJ1IA)preparations0f bmdobacteriurIl，usingthem t0detectLTA andviablebifidobacteri岫 inbifidusproducts．M劬 0ds Antisemm a nst 【rAprep锄 tions0f 黜 6口e^m6 mwere0btainedbyinjectingIA／methylatedbovinsemma1bumincomplexes withadjuvaIltintoBALB／Cmice．AUsera，usedtodetectLTAandviablebifidobacteri啪 indairyproductbydoubkanti- bodysaTId chEnz)rIIle-UnkedImm岫osorbentAssay(EUSA)andiI砌uno-cuhureme山0d，were肌alyzedbyindirect EuSApr0cedurest0deteminespecmcantib0d·ytiter．Reslllts Thema】im【alantibodytiterwasl：1280，representinga stmngcmss-reactivity th0tllerbmdobacteriaspeciesofhuIIlanorinbmd0bacte um，whilenosuchreacti、rity thn0n— b访d0bacterialspecieswasobserved．Detection0fL11AaJldViableb近dobacteri哪 wereemciendydone，withthedetecti0n 0fatleastl0CFU／In1．C0ncl吣i0ns Antisemm againstALT百vesh titerandisspecific蚰dsensitiveto genus 6口cze m．ItcaIl