重组H5N1 亚型禽流感病毒NA 基因腺病毒的滴度测定及遗传稳定性研究.pdfVIP

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2017-09-12 发布于山东
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重组H5N1 亚型禽流感病毒NA 基因腺病毒的滴度测定及遗传稳定性研究.pdf

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2010 年第8 期 H5N1 NA 1* 1 2 1 1 1 胡建和 , 王青, 徐彦召 , 郑素玲 , 吴玉苹 , 杭柏林 ( 1. , 453003; 2. , 200241) : 为了研究表达H5N1 亚型禽流感病毒N A 基因重组腺病毒pAd-N1 的遗传稳定性及重组病毒的滴度, 将重组腺病毒pAd-N1在293 细胞连续传代 20 次, 取第5101520 代的重组病毒, 采用PCR 方法扩增禽流感病毒N A 基因, 并进行基因序列分析; 用绿色荧光蛋白做标记计算出20 代次时重组病毒的滴度结果显示: 从各代重组病毒 DNA 中均扩增出了约1400bp 的目的条带, 序列分析结果表明, 第51015 代重组病毒中的N A 基因序列与原始转移载体序列完全一致, 第 20 代重组病毒插入基因有2 处发生了点突变(516 位Ay G, 1323 位 y C) , 但其编码的氨基酸未发 915 生变化, 即蛋白抗原表位未发生变化; 采用快速测定法计算出重组腺病毒的滴度为10 pfu/ mL : 禽流感; 重组腺病毒; 遗传稳定性; 病毒滴度 : S8521 65 : A : 1004-3268(2010) 08-0122-04 Virus itration and Genetic Stability of Recombinant Adenovirus Expressing N A Gene of Strain H5N1 of Avian Influenza Virus 1* 1 2 1 HU Jian-he , WANG Qing , XU Yan- zhao , ZHEGN Su-ling , 1 1 WU Yu-ping , HANG Bo- lin ( 1. College of Animal Science, H enan Institute of Science and echnology, Xinxiang 453003, China; 2. Shanghai Vet erinary Inst itute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China) Abstract: o evaluate the genetic stability and determine the virus titer of recombinant adenovirus expressing N A gene of strain H5N1 avian influenza virus ( pAd-N1) , pAd-N 1 was serially pas- saged 20 times in 293 cells. he passage 5, 10, 15 and 20 were chose for identification by PCR am-