BMP2基因转染犬牙髓成纤维细胞与异种烧结骨复合组织工程的实验研究.pdfVIP

第32卷第8期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vo1．32 No．8 · 908 · 2011年8月 JOURNAL OF HEBEIMEDICAL UNIVERSITY Aug． 2011 著 · BMP2基因转染犬牙髓成纤维细胞与异种 烧结骨复合组织工程的实验研究 ’ 冯艳红 ，刁志虹 ，高 毅 ，李 威 (1．河北省中医院口腔科，河北 石家庄050017；2．河北省石家庄市第一医院I=1腔科，河北 石家庄 050011) 【摘要】 目的 构建骨形成蛋白2(bonemorphogeneticproteins2，BMP2)绿色荧光融合蛋 白pEGFP—N1一 BMP2真核表达质粒 ，用其在体外转染犬牙髓细胞(dogdentalpulpcells，DDPCs)，利用构建的种子细胞 BMP2一 DDPCs与异种烧结骨 (xenogeneicboneceramice，XBC)复合 ，检测 BMP2一DDPCs增殖活性，扫描电镜观察 BMP2一 DDPCs在异种烧结骨中的生长情况，评价异种烧结骨作为支架材料的可行性，为将人BMP2基因转染的牙髓成纤 维细胞与异种烧结骨复合进行牙体修复的研究奠定基础。方法 构建pEGFP—N1一BMP2真核表达质粒 ，采用阳 离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的犬牙髓细胞，将构建的种子细胞BMP2一DDPCs与异种烧结骨复 合，MTr法检测BMP2一DDPCs增殖活性以及应用扫描电镜观察 BMP2一DDPCs在异种烧结骨中的生长情况。结 果 成功构建pEGFP—N1一BMP2真核表达质粒，并成功转染犬牙髓细胞。BMP2一DDPCs复合异种烧结骨组的细 胞增殖活性与单层贴壁培养BMP2一DDPCs组的细胞增殖情况差异无统计学意义(P0．05)。说明异种烧结骨上 黏附的牙髓细胞增殖情况良好。扫描电镜观察异种烧结骨上 BMP2一DDPCs黏附、生长的情况，可见支架材料的 孔径为 100～600~m，材料表面粗糙，利于细胞的黏附生长；孔隙中可见大量BMP2一DDPCs贴附于材料上，生长旺 盛、伸展 良好。结论 BMP2一DDPCs可在异种烧结骨表面及孔隙中生长、增殖，异种烧结骨可以作为牙组织工程的 支架材料。 【关键词】 骨形态发生蛋白质类 ；牙髓；狗 doi：10．3969／j．issn．1007—3205．2011．08．017 【中图分类号】 R781．3 【文献标志码】 A 【文章编号】 1007—3205(2011)08-0908-05 THEEX．PERⅡ ENTALSTUDY oF TISSUEENGINEERING oFDOG DENTAL PULP CELLSTRANSFECTED BY BMP2GENEAND CURLURED W ITH XENoGENEIC BoNE CERAM ICE FENGYanhong 。DIAOZhihong 。GAO Yi” 。U Wei (1．DepartmentStomatology，HebeiHospitalofTraditionalChineseMedicine，Shifiazhuang 050017，China；2．DepartmentofStomatology，theF HospitalofShijiazhuangCity， HebeiProvince，Shijiazhuang050011，China) ABSTRACT：Objeetive ToconstructrecombinantplasmidpEGFP—Nl—BMP2andtransfect dogdentalpulpcells(DDPCs1withpEGFP—N1一BMP2．BMP2一DDPCswereseededontoxenogeneic boneceramicefXBC)scaffoldass