免疫分析的发展趋势.pdfVIP

·59· 文章编号：1001—2087(2006)增刊一0059—06中图分类号：R446．61文献标识码：A 免疫分析的发展趋势 米歇尔·霍迪，肖恩·霍华德 (亚特斯公司研发部，拉瓦勒加拿大) 关键词：免疫分析法；生物芯片；免疫分析仪；微流体；生物传感器 测定试验的批内和批间精密度较好，变异系数(CV) 我们对酶联免疫吸附试验(ELISA)和相关免 疫测定法的现状进行了介绍，并就目前现状探讨免 均远10％，有效期也达到12个月以上。 疫测定领域未来的发展趋势。 2．自动化目前，ELISA仍然是免疫测定的首 一、免疫检测的应用 选方法。某些情况下，利用微球技术可以提高反应 效能并提高检测灵敏度，但由于ELISA的低成本 逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及其他核苷 酸检测技术(NAT)的发展，提高了对微量物质检 和可批量处理等特点，其仍然是免疫检测的主要方 测的灵敏度和特异性。例如，商业化的人类免疫缺 法。最新的全自动酶免分析系统可利用一个简单的 平台完成ELISA的所有过程，包括自动加样、孵育、 陷病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)检测试验可 达到检出10～20拷贝／m1分子的水平[1]。由于蛋白洗板及读数。这些分析仪多数为开放性系统，可以 质无法用扩增技术如PCR等进行检测，因此免疫 和大多数生产商提供的试剂盒配套使用。仪器一般 测定无法达到如此高的检测水平。不过，由于各种 因素如使用简便、成本低、可自动化操作、易于进 Westgard质控分析，同时还可以与实验室信息管理 行质控等特点，ELISA技术仍将在未来数年内广 系统LIS系统进行数据交换。最近的美国病理学家 泛应用。随着蛋白质组学、生物传感器、微流体技 学会的“CAPTODAY”杂志中刊登了一篇对几种 术和生物芯片等新技术的面世，将使免疫测定技术 自动酶免分析仪的年度报告。 成为集综合多样检测、自动化检测和成本低廉等特 现在的微球分析仪除了仍以微球作为固相外， 点于一身的新检测工具。 具有与微孔板ELISA分析仪类似的操作系统。微 二、现状 球技术的原理与ELISA相同，它扩大了反应面积 1．性能如今，ELISA和其他免疫测定法都具使得免疫反应更加充分。多种不同方法可以清除未 有显著的特点。利用酶标记系统(一般为磷酸酶或 结合的物质(离心分析法是通过离心将未结合物从 过氧化物酶)和显色法的免疫测定，分析灵敏度一 微孔中分离而使微球保留下来继续反应；也有利用 般可达到pg／ml的水平；如利用荧光或化学发光标 磁性微球通过磁场磁性分离来去除未结合物)。这 记，还可以再提高1-2个数量级。应用于这些试 些方法也可与显色法、荧光法或化学发光法相结 验的抗体也有多种，可以不受各种干扰物质(如脂 合，此时只需配合以读数装置(分光光度计或荧光 质、血红蛋白、类风湿因子、衍生物等)的干扰， 读数计或光电倍增器)来检测反应的强度，反应的 能准确的识别并结合各种临床标本(血清、血浆、 强度则与待测物浓度呈比例关系。 全血、尿样及洗鼻液等)中的特异抗原，这大大提 ELISA相关仪器未来将朝如下所述的方向发 高了分析的特异性。对筛选血液病毒，已达到了一 展：加样范围宽、精密度高(CVI．5％)的移液系 种较理想的临床检测灵敏度。例如，在检测H