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单细胞凝胶电泳技术检测蜘蛛血细胞DNA损伤研究.pdf

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中国虐亏通报 2009,25(05):48—52 ChineseAgriculturalScienceBulletin 单细胞凝胶电泳技术检测蜘蛛血细胞 DNA损伤研究 李 锐 ,李生才 ,杨怀卿 ,刘 佳 ,罗 原 (山西农业大学农学院,山西太谷030801;山西农业大学现代教育科技学院,山西太谷030801) 摘 要:以体外染毒法对星豹蛛雌、雄成蛛进行过氧化氢和甲醛染毒处理,采用单细胞凝胶电泳技术检测 蜘蛛血细胞DNA损伤效应,用CASP软件分析彗星图像,并计算受损伤细胞率、彗星尾长和Olive尾 矩。结果表明,不同浓度的过氧化氢能引起蜘蛛血细胞DNA断裂损伤,且损伤程度与浓度之间有明显 的剂量.效应关系;不同浓度的甲醛能引起蜘蛛血细胞DNA损伤,其中在10pmol/L时引起DNA断裂, 在25pmol/L、40gmol/L、55pmol/L时引起DNA交联,而在70Ixmol/L时引起血细胞凋亡。 关键词:过氧化氢;甲醛;血细胞;蜘蛛;DNA损伤;单细胞凝胶 电泳 中图分类号:$476+.2 文献标识码 :A StudyonDNADamagesofHemocytesinSpiderwithSingle CellGelElectrophoresis LiRui,LiShengcai,YangHuaiqing2,LiuJia,LuoYuan (Collegeofagronomy,ShanxiAgriculturalUniversity,TaiguShanxi030801; 2Instituteofmoderneducationtechnology,ShanxiAgriculturalUniversity,TaiguShanxi030801) Abstract:TostudyandevaluategenotoxicityofHz02andformaldehydeinthespider,Pardosaastfigera,the aduhoffemaleandmalespidersweretreatedwithH202atconcentrationsof50,75,100,125,150txmol/Land ~rmaldehydeat10,25,40,55,70txmol/L,respectively.DNA damageofhemocyteswasdetectedbythecomet assay.CASP softwarewasusedtoanalyzethecometpictures.Theresultsshow thatthepercentageofcomet, thepercentageoftaillength,andthetailmomentoftheH202testedgroupsweresignificantlydifferentfrom thoseofthecontrolgroup(P0.05).Astatisticallysignificantdose—dependentincreaseinDNAdamagewas observed.FormaldehydeinducesDNA strandbreaksat10txmol/L,butcrosslinksat25,40,55p,mol/L,and apoptosesat70I~mol/Linhemocytescellsofspiders. Keywords:Hz0z,~rmaldehyde,hemocytes,spider,DNAdamage,singlecellgelelectrophoresisassay 单细胞凝胶 电泳 (SingleCellGelElectrophoresis 技术与DNA荧光原位杂交技术 (FluorescenceInSitu Assay,SCGE)又称 彗星试 验 (CometAssay),是 由 Hybridization,FISH)结合起来,为SCGE技术的应用 Ostling等首次提出,并利用该技术

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