芝麻SSR检测体系的优化与应用.pdfVIP

中圈磨学c童报 2011,27(21)：138—143 ChineseAgriculturalScienceBulletin 芝麻SSR检测体系的优化与应用 刘红艳 ，杨敏敏 ，左 阳，舒 岩 ，赵应忠 (中国农业科学院油料作物研究所／2业部油料作物生物学重点开放实验室，武汉430062) 摘 要：为了建立一套适用于芝麻SSR标记检测的技术体 系，以5个芝麻新品种为试验材料，选用35对 SSR引物，从反应体系、反应程序、电泳、银染4个环节进行优化。结果表明：反应总体积为10 ，优化 后的基本成分及用量分别为25mmol／LMe 1．2 ，10mmol／LdNTPs0．3 ，5U／ Taq酶0．3 ， 50ng／ Primer0．9 ，10xBuffer0．7 ，25ng／ DNA模板2．5 ，ddH204．1 。反应程序为：94℃ 3min；94℃ lmin，60oC30S，72oC45S，10个循环 ；94oC30S，57oC30S，72oC45S，30个循环 ；72oC5min。 PCR产物用6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银快速染色检测效果良好。筛选出多态性较