日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进.pdf

第 16卷 第4期 集美大学学报 (自然科学版) V01．16 NO．4 2011年 7月 JoumalofJimeiUniversity(NaturalScience) Jll1．20l1 [文章编号】1007—7405(2011)04—0246—06 日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进 岳 亮 ，王艺磊 ，张子平。，冯建军 ，邹志华 ，谢芳靖 ，林 鹏 ’2 (1．集美大学水产学院，福建 厦门361021；2．福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室， 福建 厦门361021；3．德克萨斯州立大学化学和生物化学系，德克萨斯 圣马克斯 美国TX78666) [摘要】采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂 (RDP试剂)进行 日本囊对虾性腺总蛋白 质的制备，并通过双向电泳 (2一DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果．RDP法所得2一DE图谱清 晰，条纹少，蛋白质点数多，而裂解液法存在横向和纵向拖尾，其碱性端蛋白质点大量缺失，说明RDP法 能有效去除蛋白质样品中盐离子、脂类等干扰成分．结果不仅为后续的日本囊对虾性腺蛋白质组学研究提 供了技术保障，也为其他甲壳类动物性腺总蛋白质的提取提供了借鉴． [关键词]RDP法；双向电泳；日本囊对虾；裂解液法 [中图分类号]Q81 [文献标志码]A ANovelPreparationMethodofMarsupenaeusjaponicus GonadSamplesforTwo-dimensionalElectrophoresis YUELiang ，WANG Yi—lei ，ZHANGZi—ping。， FENGJian-jun ， ZOUZhi—hua ，XIEFang-jing ，LINPeng· (1．FisheriesCollege，JimeiUniversiyt，Xiamen361021，China；2．TheKeyLaboratoryofScienceand TechnologyforAquacultureandFoodS~eyt (JimeiUniversiyt)，FujianProvince，Xiamen361021，China； 3．DepartmentofChemistryandBiochemistry，TexasStateUniversiyt，SanMarcos，TX78666，USA) Abstract：ThegonadtotalproteinofponaeidshrimpMarsupen~usjaponicuswaspreparedbyaspecial reagentusedtoextractDNA，RNAandproteinsimultaneously(RDPreagent)．Theextractionefficiencywas comparedwithtraditionallysissolutionmehtodbytwo—dimensionalelectrophoresis(2-DE)．The2-DEmap ofRDPWaSclearwiht lessstriationsnadmole：proteinspots，whilehtatoflysisoslutionmehtodhadhorizontal andverticalstriationswiht decreaseofproteinspotsathtecahtodicside．TheseresultsindicatedhtatRDP mehtodcouldremovesaltnadlipidfrom gonadsampleeffectively．Th efindingfromhtestudyprovidednoton— lytechnicalsupportforproteomicsreserachofM．japonicus．butalosusefulreferenceforgonadtotalprotein extractionofothercrustacena ． Keywords：RDPmehtod