Oasis174;WCX一种新型的混合机理SPE吸附剂.docVIP

河水中百草枯和敌草快的SPE和LC-MS分析方法 Michael S. Young and Kevin M. Jenkins Waters公司 季胺类化合物百草枯和敌草快是一类大量使用的农药。据USGS1997年的估算，除草剂百草枯的使用量超过3,000,000磅 ，敌草快的使用量超过200,000磅。百草枯和敌草快属季铵盐类物质(其结构如图1所示)极性较强。使用反相色谱提取和分析时，需要使用离子对试剂达到保留和分离的目的。 图1：百草枯和敌草快的结构图 Oasis? WCX是Waters公司推出的新型弱阳离子交换和反相双重机理SPE填料，对强碱性化合物有其独特的保留和提取能力。与强阳离子交换和反相双重机理SPE填料(如Oasis? MCX)相比，Oasis? WCX更适合于极性较强的碱性化合物提取，且提取过程中使用的洗脱溶剂亦更适合于质谱分析。本文采用Oasis? WCX对百草枯及其相关化合物进行提取，获得了良好的结果。 为使液相色谱条件更适合质谱检测条件。本工作采用了具有亲水相互作用机理(HILIC)的Atlantis? HILIC色谱柱进行HPLC分离。HILIC色谱柱的分离具有与反相色谱不同的选择性，与质谱兼容的流动相，非常适合强碱性、极性化合物的分离与分析。 实验条件 仪器：Waters Alliance? 2695分离单元，带柱温箱和样品控温系统，Waters/Micro- mass Quattro Micro?三重四极杆质谱仪，Waters 2487双波长紫外检测器。 样品制备 向20mL河水样品逐滴加入1M磷酸铵缓冲液，调节pH为7。 固相提取 分别使用1mL甲醇和1mL水活化和平衡Oasis? WCX 固相提取小柱(3cc/60mg Oasis? WCX, 部件号：186002497 ) 将20mL经过处理的河水样品上样至小柱 分别用1mL 1M pH7的磷酸盐缓冲液，1mL水和1mL甲醇清洗小柱 用1.5 mL乙腈∶水∶三氟乙酸( 84:14:2)混合溶液洗脱目标组分 用流动相定容至0.5mL，待用 图2：0.5μg/L百草枯和敌草快在Atlantis? HILIC色谱柱上分离的LC-MS谱图。右侧插入图谱为HILIC法与离子对-反相色谱分离法的LC-MS响应值的对比结果。 液相色谱条件(请将此条件排于色谱图旁－即图2及图3旁) 色谱柱：Atlantis? HILIC, 2.1 × l 50 mm, 3.5 μm 流动相：乙腈∶250mM甲酸铵缓冲液，pH3.7（40∶60） 流速：0.4 mL/min 进样体积：20μ L 柱温：30 °C 用于LC-UV分析的色谱柱：Atlantis dC18, 2.1× 150mm, 3.5 μm 流动相：乙腈∶0.1%七氟丁酸水溶液（25∶75） 流速：0.3 mL/min 进样体积：20μ L 柱温：30 °C 质谱分析条件 表1 百草枯和敌草快的质谱分析条件 化合物 分子量 MRM 锥孔电压 碰撞能量 百草枯 261 17177 40 35 171155 40 35 敌草快 319 183157 40 30 183168 40 35 结果和讨论 20mL河水样品的分析结果显示，被测组分在0.1 - 10 μg/L的范围内呈良好的线性。定量限低于0.2μg/L。图2为0.5μg/L空白加标样品的色谱图。 配制一系列1μg/L(1 ppb)的空白加标样品，每份样品一天内重复进样5次，连续5天进样。实验结果见表2。 表2：空白河水加标样品（浓度1.0μg/L）日内分析结果 百草枯 敌草快 第1天 1.08 μ_g/L (8.1% RSD) 第1天 1.05 μ_g/L (2.9% RSD) 第4天 1.10 μ_g/L (8.0% RSD) 第4天 1.09 μ_g/L (5.9% RSD) 第5天 0.95 μ_g/L (7.1% RSD) 第5天 1.08 μ_g/L (4.4% RSD) 平均值 (n = 15) 1.04 mg/L (9.8% RSD) 平均值 (n= 15) 1.08 mg/L (4.8% RSD) 由图2可见，LC-MS的分析结果灵敏度更高(见图2右侧的HILIC与离子对色谱法分析的比较图)，更适合于此分析。而相同的Oasis? WCX固相提取方法也适合离子对-反相液相色谱分析。图3展示了使用离子对试剂时，0.5μg/L的空白加标样品在Atlantis? dC18柱上的反相色谱分离结果。然而，流动相中使用的离子对试剂与高灵敏度的LC-MS分析不兼容。 使用新型Oasis? WCX吸附剂和Atlantis? HILIC分析柱以及LC-MS，只需20mL的样品，百草枯的定量限低于100 ng/L (