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实验六、微生物大小的测定与显微计数
〔目的要求〕学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法;了解血细胞计数板的构造及计数原理,掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
〔材料用具〕,啤酒酵母(每组二瓶);显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺;血球计数板;盖玻片,载玻片,滴管,试管,无菌水,
注意:老式显微镜(目镜可换)12台(按每桌两台),请检查相应的灯源、高倍速物镜的情况,如果高倍镜不好,请配置一下;并配置有可装目镜测微尺的目镜。
〔方法步骤〕
(一)酵母细胞大小测定
目镜测微尺的校正 (2) 细胞大小的测定
(二) 显微计数法
镜检计数室
菌悬液制备及加样
计数
清洗计数板
〔结果分析〕结果记录入表中。
1、目镜测微尺的标定结果(精确到零点几小格)
物镜倍数
(目镜均为10倍) 目镜测微尺的格数
(小格) 镜台测微尺的格数
(小格) 目镜测微尺的每格的长度(μm) 40倍 2、酵母菌大小测定结果
菌号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 目镜测微尺的格数(小格) 长轴 短轴 酵母大小平均值=±(保留小数点后2位)
长轴= 短轴=
3、血细胞计数板对酵母菌悬液计数结果
实验次数 各中格中菌数 总菌数 稀释倍数 平均值 菌数(个/mL) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 〔实验讨论〕
作业:
什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺校正。
. 根据实验体会说明血细胞计数法的误差主要来自哪些方面?如何减少误差?
. 在滴加菌液时,为什么要先置盖玻片然后滴加菌液?能否先加菌液再置盖玻片?
. 用血球计数板测定微生物数量时,哪些步骤易造成误差?如何预防?计算细胞数目时此法是否可以适用?
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