大蒜素联合丝裂霉素治疗MBT-2荷瘤小鼠疗效及其机制研究.pdfVIP

大蒜素联合丝裂霉素治疗MBT-2荷瘤小鼠疗效及机制的研究 中文摘要 【目的】 本实验先通过体外试验观察各药物抗MBT一2的作用，然后用有免疫功能的小 鼠建立MBT一2移植瘤模型，研究大蒜索联合丝裂霉素治疗膀胱癌的疗效，并从分 子生物学水平阐明这一治疗方案可能的机制，从而为大蒜素联合丝裂霉素临床治 疗膀胱癌的可行性提供可靠的实验证据及理论依据。 【方法】 应用细胞传代培养技术培养获得小鼠膀胱癌细胞MBT一2(Murine bladdertumor cells)后，用四氮唑蓝法(MTT法)检测各药物体外抗肿瘤 细胞的作用，然后将MBT一2接种于同基因小鼠皮下建立膀胱癌荷瘤小鼠模 型。将100只荷瘤小鼠随机分为4组，即空白对照组(A组)、大蒜素组(B组)、 丝裂霉素组(C组)、大蒜素联合丝裂霉素组(D组)，按实验方案在肿瘤周围皮下 注射药物治疗。治疗3周后每组随机取出15只小鼠称重后处死，解剖小鼠观察 肿瘤肝肺转移的情况，分离出小鼠肝脏、脾脏、肺脏等重要器官，通过HE病理 切片计算肿瘤转移率；分离出肿瘤计算抑瘤率，肿瘤组织采用RT—PCR测定 TP53(野生型)mRNA的表达和免疫组化测定Ki一67蛋白。其余的小鼠继续按试验 方案治疗直至死亡，计算每只小鼠的生存时间(即从接种肿瘤细胞到死亡的时 间)。所得数据使用SPSS统计软件分析。 【结果】 1．在体外各药物对MBT一2细胞生长的抑制作用 空白对照组、大蒜素组、丝裂霉素组、大蒜素联合丝裂霉素组中MBT一2细胞 增殖抑制率分别为0、40．O％、56．0％、92．0％，各组MBT一2细胞增殖抑制率比 较有统计学意义(尺0．01)。 2．各药物对小鼠移植瘤生长的抑制作用 丝裂霉素组、大蒜素组、丝裂霉素加大蒜素组对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为 38．4％、32．8％、73．2％，各组荷瘤小鼠的抑瘤率比较有统计学意义(KO．05)。 3．各药物对小鼠移植瘤转移的抑制作用 对照组、丝裂霉素组、大蒜素组、大蒜素加丝裂霉素组小鼠肿瘤肺转移率分 4．各药物对荷瘤小鼠生存时间的影响 丝裂霉素加大蒜素组、大蒜素组、丝裂霉素组、空白对照组荷瘤小鼠的生 天。各用药组生存时间两两比较有统计学意义(P(0．05)。 5．各药对小鼠移植瘤组织中Ki一67蛋白表达率的影响 丝裂霉素加大蒜素组、丝裂霉素组、大蒜素组、空白对照组MBT一2肿瘤组织 2．35％。各组MBT一2移植肿瘤组织中Ki一67的表达两两比较有统计学意义(P0．05)。 6．各药对小鼠移植瘤组织中突变型P53基因表达的影响 丝裂霉索加大蒜素组、大蒜素组、丝裂霉素组、空白对照组移植瘤组织中突 和0．875±O．064。各组移植瘤组织中TP53的表达两两比较有统计学意义 (P0．05)。 【结论】 1．在体外，大蒜素和丝裂霉素能抑制MBT2细胞的生长。 2．大蒜素和丝裂霉素能抑制blBT一2肿瘤生睦和转移并明显延长荷瘤小鼠的生存 时间。 3．大蒜素和丝裂霉素体内抗MBT一2肿瘤的作用可能与其调节MBT一2细胞中TP53 和Ki一67的表达有关。 4．大蒜素联合丝裂霉素具有协同抗MBT一2肿瘤的作用，其效果优于单一用药。 【关键词】 膀胱肿瘤；大蒜素； p53；Ki一67；生存时矧 and Theeffectmechanismsofallicinassociatedwith onmice mitomycin MBT-2 beared tumor Abstract objective Bladdercanceristhemostcommon inthe in neoplasmurinarysystemChina， have which in anda recurrencerate local multicentricityspace high