离子液体中脂肪酶催化（±）薄荷醇拆分研究.pdf

中文摘要 研究了在新型绿色溶剂离子液体[bmhn]PF6中，脂肪酶CRL催化(±)一薄荷 醇手性拆分过程中的影响因素，并采用5．因素-5．水平中心可旋转复合设计和响 应面法评价了反应参数对底物转化率和产物对映体过量率的影响，这些参数包 括：反应时间、反应温度、酶加入量、底物摩尔比例和反应体系的水活度。其 中反应温度、酶加入量、底物比例和反应时间是显著的影响因素。通过响应面 法还得到了最佳反应条件(反应时间为10h，反应温度为27．52、酶加入量为 验证，证明转化率和对映体过量率的预测值和真实值具有很好的符合性，分别 为53．84、53．77和84．78、84．05。 由于在离子液体中游离酶反应后不易回收，所以进行了自制固定化酶的研 究并探讨了其在离子液体中的催化性能。利用具有超顺磁性的2-1叫m的微球 作为载体，采取直接共价结合以及用阴离子交换荆DEAE修饰后在不同pH值 缓冲液离子吸附的方法对脂肪酶CRL进行了固定化。考查了制备的固定化酶应 用于离子液体反应体系的特点，从反应时间、反应温度、固定化酶的pH值、 酶的水含量等方面进行了系统的研究，发现在较低pH下进行离子吸附对酶蛋 白有一定的纯化作用，固定化酶的选择性较高。在pH5．0下制备的固定化酶相 对于游离酶催化外消旋薄荷醇的酯化，立体选择性有很大提高，反应进行24h， 对映体过量率仍然达到905以上，外消旋薄荷醇得到了有效的分离。最后对比 了游离酶和固定化酶在离子液体中的操作稳定性。二者的转化率下降相当，但 是固定化酶仍然保持了较高的对映体过量率，为初始的70％。 关键词：脂肪酶CRL离子液体手性拆分响应面法固定化薄荷醇 ABSTRACT The of fromCandidato theresolution abilitylipase rugosacatalyze of(+)一menthol was surface methodology(RSM)and investigated．Response central rotatable toevaluatetheeffectsof composite employed design(CCRD)were asreaction of synthesisparameters,suchtime,temperature，amountlipase，substrate molarratioofmentholto water inreaction activity system propionicanhydride，and on conversionofmentholand enantiomericexcess．Reaction production temperature， themost mountof molarrationandreactiontimeWere significant lipase，substrate on of conditionswereas variables．Basedthe RSM,theresolution analysis optimum follows：reactiontime10 27．52 of 161．97 oC,amount