Smad4通过fascin和cortactin影响肝癌细胞SMMC-7721迁移的研究.pdfVIP

# 676# 医学研究生学报 20 11年 7 月 第 24 卷 第 7 期 J M d P ostgra, V o.l 24, N o. 7, Ju ly, 2011 论 著 (基础研究 ) Sm ad4通 过 fascin和 cortactin 影 响 肝 癌 细 胞 SMMC- 7721迁 移 的 研 究 韩 香, 黄晓丹, 薛慧婷, 黄 曙, 张发明, 季国忠 [摘要 ] 目的 Sm ad4 是细胞 内的信号转导蛋 白, 在 TGF- B家族信号转导 过程 中发挥重要作用, 其 表达缺失或 突变与肿 瘤 的发生、发展密切相关。文 中通过慢病毒载体技术, 使肝癌细胞 中 Sm ad4 低表达, 观察 Sm ad4 对肝 癌细胞 SMMC- 7721迁移 过程 的影响并探讨可 能的机制 。 方法 构建 Sm ad4 的 RNA 干扰 ( RNA int r f r n c , RNA i)慢病毒载体, 经包装、浓 缩及检测 病毒滴度后感染肝癌 细胞 SMMC- 7721, 检测 Sm ad4 的表 达; 筛 选 出 2 组 Sm ad4 干扰 效率高 的细胞, RNA -i Sm ad4- 2 组 和 RNA -i Sm ad4- 12 组, 对照组为肝癌细胞 SMMC- 7721和感染慢病毒空 载体的肝 癌细胞 ( RNA -iNC ); 细胞 划痕及三 维 ( thr - d mi n sion, 3D )培养方法检测细胞迁移能力变化; W st rn b lot法检测 fasc in 和 cortact in 蛋 白水 平 的变 化 。 结 果 酶 切、PCR 结 果表 明 Sm ad4 的 RNA i慢病毒载体构建成功, RNA i- Sm ad4- 2 组和 RNA i- Sm ad4- 12 组细胞 中 Sm ad4 蛋 白表达 明显降低 ( P 0. 0 5); 较之 SMMC- 772 1组和 RNA -iNC 组, RNA -i Sm ad4- 2 组及 RNA i- Sm ad4- 12 组细胞的划痕愈合 时间更快, 3D 培养环境 中干扰组 细胞边 缘不规则, 向周 围凝胶渗透; RNA i- Smad4- 2 组和 RNA -i Sm ad4- 12 组细胞 中 fascin 和 cortact in 的蛋 白表达 量均高 于 SMMC- 772 1 组和 RNA i-NC组细胞 ( P 0. 05) 。 结论 低表达 Smad4 后可通过上调 细胞骨架相 关蛋 白 fascin 和 cortact in, 进而 促进肝癌 细胞 SMMC- 7721的迁移能力。 [ 关键词 ] Sm ad4; Fascin; Cortact in; 肝癌细胞; 迁移 [ 中图分类号 ] Q257 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] 100 8- 8 199( 20 11) 07- 0676- 07 L nt iv ira-lm d ia t d Sm ad4 RNA i in flu n c s SMM C- 7721 c llm igra tion by r gu la tin g fascin an d cor ta ctin HAN X ian g, HUANG X iao- dan, XUE H u -i tin g, HUANG Shu, ZHANG F a- m ing, JI Guo- zhong ( In stitut of D ig stiv E ndoscopy and M dica l C nt r for D ig stiv D is a s s, S cond A