杉木PGPR菌分离筛选及其微生物复合菌肥研制.pdfVIP

摘 要 杉木(Cunninghamialancceolata)是亚热带针叶树种，而且是我国特有的速生针 叶用材林树种，栽培区域达16个省市之多，木材产量超过了全国商品用材的25％。 然而，杉木人工纯林连栽引起地力严重衰退及生产力下降。虽然通过树种搭配构建混 交林能有效缓解林地土壤结构和养分衰减，但仅靠林分优化提高肥力的效果有限，土 壤N、P等元素仍然缺乏，严重制约了人工林可持续发展。因此本研究对杉木根际固 氮菌、溶磷菌进行筛选，得到高效固氮、解磷菌株；并对其分泌IAA，生理生化等 特性进行研究，发酵条件优化，适当比例复配，形成微生物复合菌肥，使用于杉木 幼苗，进行肥效检测。主要研究结果如下： (1)采用Ashby培养基筛选杉木根际固氮菌，用乙炔还原测定固氮菌固氮酶活， 得到16株固氮能力较强的菌株。利用蒙金娜有机培养基和PKO培养基筛选杉木根际解 磷菌，根据透明圈直径(D)／菌落大小(d)的比值，分离筛选出D／d大于1．6的解有机磷和 无机磷菌株各12株。筛选出来的固氮菌，溶磷菌用Salkowski比色法测定IAA分泌最。 nmol·mL-I．h～，NGX．5次之为237．4nmol·mL-1·h～。大部分菌株都能分泌生长素，有6 株菌分泌能力较强IAA浓度大于20 7．13 lmg／100mL，5．907mg／100mL和6．5l 磷菌Pw6这6株菌，在多功能微生物菌肥研制中具有重要开发潜能。 (2)对固氮菌和溶磷菌分别做摇瓶发酵条件优化，通过单因子变最和正交试验得 到最佳摇瓶发酵条件，固氮菌最适条件为：葡萄糖129，氯化钠0．29，碳酸钙59，磷 解磷菌最适条件为：葡萄糖109，磷酸钙39，硫酸铵O．59，氯化钠O．19，硫酸镁0．19， 温度30℃；解有机磷解磷菌最适条件为：葡萄糖109，硫酸铵O．59，氯化钠0．39，氯 60mL(250mL三角烧瓶)这样使同氮菌的酶活以及解磷菌的解磷力达到最高。 (3)将固氮菌，解有机磷菌和解无机磷菌按最佳发酵条件发酵分别用无菌水稀释， 按照不同比例复配，以草木灰和甲壳素为载体施用于0．5年生的杉木苗17株，月增长 率为33．9％．90．5％，得到最佳复合生物菌肥配方：固氮菌，解有机磷菌和解无机磷菌 稀释成质量百分浓度均为15％，按体积比为1．5：1：l的比例混合搅匀，得到混合菌液； 固体载体按照草木灰20％，发酵培养基50％，混合菌液30％。 关键词：杉木；PGPR，固氮菌；解磷菌；发酵条件优化；微生物复合菌肥； Il ABSTRACT lanceolataisa conifer anendemic species，as fast—growing Cunninghamia subtropical conifer of is inmorethan16 anditslumberismore china,it provinces yield species grown continuous timberin artificial than25％ofcommercialchina．However,repeatedpure of lanceolatahascausedseveredeclineinsoil andits croppingcunninghamia fertility elementscanbe thestructureofforestlandandthelossofnutritional pro