两株致病力不同的核盘菌形态变化研究论文.docVIP

?３０? １．２．３细胞透射电子显微镜观察  黄娟等：两株致病力不同的核盘菌形态变化研究 下观察，并照相。 在ＰＤＡ平板（直径９ ｃｍ）上平铺张直径略小于 ９０ ｍｍ的无菌玻璃纸，使玻璃纸紧贴于培养基。将 ２结果 活化的菌株Ｅｐ—ｌＰＮ和Ｅｐ一１ＰＮＡ５菌丝分别移接 ２．１ 茵落形态和生长特性观察 在玻璃纸中央。在２０℃下培养３ ｄ。用剪刀分别剪 下大小约为０．５×０．５ ｅｒａ（长×宽）含有菌落边缘菌 强致病型的Ｅｐ一１ＰＮＡ５和弱致病型的Ｅｐ一 １ＰＮ菌株在生长速度、菌落形态和菌核产生等特征 丝的玻璃纸，作为制备ＴＥＭ观察的样品。用体积分 完全不同。Ｅｐ—ｌＰＮＡ５的菌丝生长速度为１．８ ｅｍ／ 数２％的戊二醛溶液（Ｏ．０５ ｔｏｏｌ?Ｌ。甲砷酸钠缓冲 液配制，ｐＨ７．０）将菌丝样品在４。Ｃ下浸泡过夜（约 ｄ，而Ｅｐ一１ＰＮ仅为０．２ ｅｍ／ｄ，前者是后者的８倍。 Ｅｐ一１ＰＮＡ５是正常的菌株，其在平板上的菌落呈圆 １６ ｈ），再用０．１５ ｔｏｏｌ?Ｌ。１磷酸缓冲液将样品洗涤３ 形扩展，而且很均匀，气生菌丝不发达且很少，大约 次，每次１０ ｍｉｎ。然后将样品放人质量分数２％四 ７ ｄ后能形成呈同心环状排列的黑色菌核，如图１ Ａ 氧化锇溶液中固定２ ｈ。接着用５％乙酸铀（含５０％ 乙醇）染色１ ｈ，用乙醇脱水后在７０℃下包埋。最后