RNA干扰沉默胃癌HDAC1基因表达的实验研究论文.docVIP

RNA 干扰沉默胃癌 HDAC1 基因表达的实验研究  申  请  者：庄 涵 虚  导  师：王 小 众 马 旭 东 中文摘要  教授 教授  【目的】  研究组蛋白去乙酰化酶（HDAC1）、组蛋白 H3、H4 乙酰化在胃癌患者  异常表达及其意义，寻找胃癌分子治疗的新标靶；设计针对 HDAC1 基因的小干扰 RNA 片段，观察 HDAC1 小干扰 RNA 对人类胃癌 MGC803 细胞增殖、凋亡的影响；探 讨 HDAC1 小干扰 RNA 对 MGC803 细胞组蛋白甲基化、乙酰化的影响。  【方法】  1、免疫组织化学方法检测 HDAC1、组蛋白 H3、H4 乙酰化在胃癌、慢  性浅表性胃炎，萎缩性胃炎、中重度不典型增生病理组织中的表达，统计学分析 探讨其临床意义。2、设计针对 HDAC1 基因 4 个小干扰 RNA 片段，经 Lipofectamine 2000 脂质体转染入 MGC803 细胞，RT-PCR 及蛋白免疫印迹法（Western Blot）筛 选最佳干扰片段。 3、应用四唑盐（MTT）法绘制细胞生长曲线，观察 HDAC1 siRNA 对 MGC803 细胞增殖的影响；TUNEL 分析细胞调亡。 4、Western blot 检测 HDAC1 siRNA 对 BCL-2，Caspase-9、Caspase-3、P21、C-myc 蛋白表达