苦柯胺B对脓毒症小鼠肺脏炎症反应的抑制作用.pdfVIP

中华危重病急救医学2014年7月第26卷第7期 ChinCritCareMed，July2014，Vol.26，No.7 ·493 · ·论著· 苦柯胺B对脓毒症小鼠肺脏炎症反应的抑制作用 张锦丽 秦魏婷 吕汪洄 沈唯长 王旭 孙炳伟 【摘要】 目的 探讨苦柯胺B（KB）对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用及分子机制。方法 将28只 雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组（8只）、脂多糖（LPS）组（10只）、LPS+KB组（10只）。腹腔注射 LPS20mg/kg制备脓毒症模型（LPS组）；对照组给予等体积生理盐水；LPS+KB组于LPS刺激4h后经尾静脉 注射KB20滋g/kg。于LPS刺激后8h检测动物血浆LPS浓度及肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性；采用酶联免 疫吸附试验（ELISA）检测血浆、肺泡灌洗液及肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-琢 （TNF-琢 ）和白细胞介素-1茁 （IL-1茁）的含量；用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测肺组织核转录因子-资B（NF-资B）活性和诱导型一氧 化氮合酶（iNOS）蛋白表达；用苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理学改变；免疫组化法观察肺组织中细胞 间黏附分子-1（ICAM-1）蛋白表达。结果 与对照组比较，LPS组血浆LPS浓度（kEU/L：1155.650±147.149 比31.390±18.859）、MPO活性（U/g：1.177±0.093比0.775±0.166）、NF-资B活性（灰度值：1.557±0.105比 0.824±0.032）、iNOS蛋白表达（灰度值：0.650±0.129比0.392±0.097）均显著升高（均P＜0.05）；KB干预后 LPS浓度（624.461±149.012）、MPO活性（0.919±0.023）、NF-资B活性（1.127±0.074）、iNOS蛋白表达（0.425± 0.066）均被明显抑制（均P＜0.05）。与对照组比较，LPS组血浆、肺泡灌洗液、肺组织匀浆中TNF-琢 （ng/L： 47.325±13.864比6.534±0.544，13.382±2.231比3.748±0.692，31.127±7.399比14.948±4.673）、IL-1茁 （ng/L：74.329±11.890比29.921±6.487，9.422±2.674比1.105±0.364，528.509±32.073比109.945±13.561） 浓度均显著增加（均P＜0.05）；而应用KB干预后TNF-琢 （20.331±7.789、7.145±1.202、15.966±2.946）、 F＝16.052、P＝0.002， IL-1茁（57.707±8.098、2.212±0.878、426.154±11.270）浓度均明显降低（血浆TNF-琢 ： F＝20.649、P＝0.000；肺泡灌洗液TNF-琢 ：F＝31.134、P＝0.001，IL-1茁 ：F＝22.792、P＝0.002；肺组织匀 IL-1茁 ： F＝10.013、P＝0.009，IL-1茁 ：F＝319.857、P＝0.000）。光镜下观察显示，与LPS组比较，KB干预后肺 浆TNF-琢 ： 组织病理改变明显减轻，ICAM-1表达明显减少。结论 KB作为新型的LPS中和剂，能够拮抗LPS对脓毒症小 鼠的炎症刺激作用，减轻肺部炎症反应，保护脓毒症小鼠的肺脏功能。 【关键词】脓毒症；苦柯胺B；炎症反应；肺 Inhibitory effect of kukoamine B on lung inflammatory responses in mice with sepsis Zhang Jinli ，Qin Weiting ，Lyu Wanghui ，Shen Weichang ，Wang Xu ，Sun Bingwei. Department of Burns and Plastic Surgery ， Affiliated Hospital ，Jiangsu University ，Zhenjiang 212001 ，Jiangsu ，China Corresp