水貂细小病毒分离鉴定及卵黄抗体制备.pdf

摘要 摘要 水貂传染性肠炎又名水貂病毒性肠炎，是由水貂肠炎病毒(MEV)引起的一种急性、 高度接触性、致死性传染病。该病广泛存在于世界各国，是威胁水貂养殖的最大疾病之 一，给养貂业带来巨大的经济损失。在我国水貂传染性肠炎的预防主要是定期免疫接 种，但近年来应用疫苗免疫失败的现象时有发生，有时呈地方性流行。发病水貂除采取 对症治疗外，没有有效的治疗药物，为此，我们开展水貂水貂的流行病学研究工作，并 在此基础上，开展抗水貂病毒性肠炎抗体的研究工作。 本研究应用猫肾FSl细胞从疑似MEV感染的水貂病料中分离病毒，通过血凝试 验、PCR等方法对分离得到的病毒进行鉴定。同时对分离得到的病毒和大连送检的水貂 病料的VP2基因进行了测序和遗传进化分析。在此基础上，以分离得到的病毒为抗 原，选择种属关系远的蛋鸡作为免疫对象，制备卵黄抗体。利用氯仿和硫酸铵结合的方 法提纯卵黄抗体，应用血凝抑制试验评定抗体的效价。结果利用F81细胞成功分离出一 株病毒，命名为MEV-ZYL．1，鉴定结果表明这是一株水貂细小病毒强毒株，具有良好 的免疫原性。序列测定结果表明，MEV-ZYL．1与引起大连水貂肠炎的病毒同源性 type2 系近，为目前国内流行株。用MEV-ZYL．1为种毒制备灭活疫苗免疫健康产蛋鸡，得到 含有抗MEV抗体的鸡蛋，用氯仿和硫酸铵结合的方法提取卵黄抗体，血凝抑制试验表 明抗体水平随免疫次数的增加呈上升趋势，三免后的血凝抑制价为l：1024。对感染 MEV的水貂进行治疗，治愈率100％，研究结果显示，MEV卵黄抗体可进一步开发用 于水貂细小病毒肠炎的治疗。 关键词水貂细小病毒；分离鉴定；VP2基因；卵黄抗体 Abstract Abstract MinkinfectiousenteritisthatisalsoknownasmillI【viral an enteritis，causedacute，high Minkenteritis diseaseis inthe contactandfataldisease virus(MEV)．T11iS by widespread inmink mink have worldandoneofthe diseases farm．Curremlyalthoughpopulations greatest with infectiousenteritisstiUoccurred．Andthetreatment been vaccine widely immunity,mink is isnoeffective itis to treatment，there necessary mainlysymptomatic therapy．Therefore the characteristicsandunderstandtheinfectionsituationof comprehensivelystudybiological in conductanti．MEV research．MEVwerecollectedfrom MEV China,and antibody samples