利用实时荧光PCR进行植原体通用检测Utilizationof.pdfVIP

农业生物技术学报，  年， 第  卷， 第  期， 第  页  2011 19 4 771~776 Journal ofAgriculturalBiotechnology,2011,Vol.19,No.4,771~776  技术改进  UpdatedTechnology  利用实时荧光 PCR 进行植原体通用检测 1,2  2  1  1,2  2*  张甜甜  牟海青  刘长霞  朱水芳  赵文军  1 100029 2 100029  北京化工大学生命科学与技术学院， 北京 ； 中国检验检疫科学研究院， 北京  * wenjunzhao@188.com  通讯作者，  摘 要 本实验意在研究一种能够应用于植原体初筛， 并且不易污染， 易操作耗时短的通用方法。比较了已 报道  实时荧光  与目前最常用巢式  在植原体通用检测中的应用。利用  种植原体感染植 TaqMan  PCR  PCR  12  株及  种健康植物  测试了实时荧光  的特异性及通用性。 所有植原体材料均获得强的荧光信号， 为 9  DNA  PCR  阳性结果， 而健康植物 DNA及空白对照均为阴性结果。 实验结果证明该实时荧光 PCR 应用于植原体通用检 测具有良好的特异性， 相对灵敏度比巢式  高  倍， 耗时短， 操作方便， 有效避免了  产物污染。实时 PCR  10 PCR  荧光 PCR 为植原体病害的口岸检疫、 田间监测及大量样品的通用检测提供了良好的技术支撑， 是一种可能 代替 目前最常用巢式 PCR 的方法。 关键词 植原体， 实时荧光 PCR， 巢式 PCR， 通用检测  Utilization ofReal­timePCR for GeneralDetection ofPhytoplasma  1,2  2  2  1,2  2*  ZhangTiantian  MouHaiqing  LiuChangxia  Zhu Shuifang  ZhaoWenjun  1College ofLife Science and Technology,Beijing University of Chemical Technology,Beijing 100029, China;2 ChineseAcademy ofInspection and  Quarantine,Beijing 100029,China  *Corresponding author,wenjunzhao@188.com  DOI: 10.3969/j.issn.1674­7968.2011.04.025 Abstract  The aim ofthisassay isto investigate on the TaqMan Real­time PCRmethod forphytoplasma general  detection which has the superiorities in saving time and preventing contamination. One developed TaqMan  Real­time PCR assay for general detection of phytoplasma was evaluated in co